中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2013年
6期
992-994
,共3页
陈佳玉%戚永孝%陈洁%金晓燕%张丽荣
陳佳玉%慼永孝%陳潔%金曉燕%張麗榮
진가옥%척영효%진길%금효연%장려영
丙肝核心抗原%CD40%配体%载体
丙肝覈心抗原%CD40%配體%載體
병간핵심항원%CD40%배체%재체
目的 构建丙肝核心抗原-CD40L胞外段融合蛋白真核表达载体,并探讨其免疫原性.方法 应用基因重组技术在原有载体的基础上构建真核表达载体pcDNA3.1-core-CD40L并加以鉴定.该表达质粒肌肉内注射免疫小鼠,ELISA法检测小鼠外周血中抗丙肝核心抗体,流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚型,real time PCR法检测外周血单个核细胞内细胞因子,CTL杀伤实验检测小鼠脾淋巴细胞的杀伤活性.结果 构建了真核表达载体pcDNA3.1-core-CD40L,该载体能诱发小鼠产生高滴度的抗丙肝核心抗原的抗体,流式和real time结果证实该质粒能诱使小鼠T淋巴细胞由T0期向Th1和Th2转换,并以Th1为主,CTL杀伤结果显示该表达质粒能诱使小鼠产生高水平的细胞杀伤能力.结论 成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-core-CD40L,该质粒能够在小鼠体内正确表达,并能诱发高水平的细胞杀伤活性.
目的 構建丙肝覈心抗原-CD40L胞外段融閤蛋白真覈錶達載體,併探討其免疫原性.方法 應用基因重組技術在原有載體的基礎上構建真覈錶達載體pcDNA3.1-core-CD40L併加以鑒定.該錶達質粒肌肉內註射免疫小鼠,ELISA法檢測小鼠外週血中抗丙肝覈心抗體,流式細胞儀檢測小鼠外週血T淋巴細胞亞型,real time PCR法檢測外週血單箇覈細胞內細胞因子,CTL殺傷實驗檢測小鼠脾淋巴細胞的殺傷活性.結果 構建瞭真覈錶達載體pcDNA3.1-core-CD40L,該載體能誘髮小鼠產生高滴度的抗丙肝覈心抗原的抗體,流式和real time結果證實該質粒能誘使小鼠T淋巴細胞由T0期嚮Th1和Th2轉換,併以Th1為主,CTL殺傷結果顯示該錶達質粒能誘使小鼠產生高水平的細胞殺傷能力.結論 成功構建瞭真覈錶達質粒pcDNA3.1-core-CD40L,該質粒能夠在小鼠體內正確錶達,併能誘髮高水平的細胞殺傷活性.
목적 구건병간핵심항원-CD40L포외단융합단백진핵표체재체,병탐토기면역원성.방법 응용기인중조기술재원유재체적기출상구건진핵표체재체pcDNA3.1-core-CD40L병가이감정.해표체질립기육내주사면역소서,ELISA법검측소서외주혈중항병간핵심항체,류식세포의검측소서외주혈T림파세포아형,real time PCR법검측외주혈단개핵세포내세포인자,CTL살상실험검측소서비림파세포적살상활성.결과 구건료진핵표체재체pcDNA3.1-core-CD40L,해재체능유발소서산생고적도적항병간핵심항원적항체,류식화real time결과증실해질립능유사소서T림파세포유T0기향Th1화Th2전환,병이Th1위주,CTL살상결과현시해표체질립능유사소서산생고수평적세포살상능력.결론 성공구건료진핵표체질립pcDNA3.1-core-CD40L,해질립능구재소서체내정학표체,병능유발고수평적세포살상활성.
