CAJ | 학술논문

细胞色素P450还原酶(cytochrome P450 reductase,CPR)是生物体内氧化系统中的电子供体,在细胞色素P450介导的氧化还原反应中起限速作用,是氧化反应中的关键酶.本研究根据已经报道的其他植物的CPR基因设计简并引物,并在洋甘菊(Matricaria recutita L.)中克隆CPR基因的部分片段,然后通过RACE扩增得到CPR基因全长.结果表明,克隆得到洋甘菊的CPR基因,提交至GenBank,得到登录号KJ004519,其cDNA全长2272 bp,包含2106 bp的编码区,翻译701个氨基酸序列;生物信息学分析表明,洋甘菊与青蒿(Artemisia annua)的亲缘关系最近,CPR基因氨基酸序列有94％的相似性,CPR蛋白质结构包括结合P450结构域和辅因子黄素腺嘌呤二核甘酸(flavin adenine dinucleotide,FAD)和黄素单核甘酸(flavin mononucleotide,FAM)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADP)结构域;通过qRT-PCR检测CPR基因在洋甘菊开花阶段舌状花冠、管状花冠、茎和叶中的表达量,结果表明,CPR mRNA转录本积累量在管状花冠中表达量最高,是叶中表达量的20多倍,在舌状花冠和茎中有微量表达量.本研究首次克隆了洋甘菊中CPR基因,CPR基因是植物萜类的氧化修饰过程中关键酶,为进一步研究细胞色素P450氧化酶系在洋甘菊中萜类的生物合成途径中的具体作用提供了基础资料.
세포색소P450환원매(cytochrome P450 reductase,CPR)시생물체내양화계통중적전자공체,재세포색소P450개도적양화환원반응중기한속작용,시양화반응중적관건매.본연구근거이경보도적기타식물적CPR기인설계간병인물,병재양감국(Matricaria recutita L.)중극륭CPR기인적부분편단,연후통과RACE확증득도CPR기인전장.결과표명,극륭득도양감국적CPR기인,제교지GenBank,득도등록호KJ004519,기cDNA전장2272 bp,포함2106 bp적편마구,번역701개안기산서렬;생물신식학분석표명,양감국여청호(Artemisia annua)적친연관계최근,CPR기인안기산서렬유94％적상사성,CPR단백질결구포괄결합P450결구역화보인자황소선표령이핵감산(flavin adenine dinucleotide,FAD)화황소단핵감산(flavin mononucleotide,FAM)화연선알선표령이핵감산린산(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADP)결구역;통과qRT-PCR검측CPR기인재양감국개화계단설상화관、관상화관、경화협중적표체량,결과표명,CPR mRNA전록본적루량재관상화관중표체량최고,시협중표체량적20다배,재설상화관화경중유미량표체량.본연구수차극륭료양감국중CPR기인,CPR기인시식물첩류적양화수식과정중관건매,위진일보연구세포색소P450양화매계재양감국중첩류적생물합성도경중적구체작용제공료기출자료.