CAJ | 학술논문

目的：克隆表达与纯化肺炎支原体mpn 668蛋白。方法以Mp 129株基因组DNA为模板，PCR法扩增目的基因mpn 668，将其亚克隆至pGEX-6 P-1载体中。经鉴定后将其转化至表达菌E.coli BL 21中进行诱导表达。采用SDS-PAGE和蛋白质印迹等方法对表达产物进行分析鉴定并纯化GST融合蛋白。结果成功扩增出总长度为423 bp的mpn 668基因，所构建的原核重组质粒经PCR、双酶切以及测序鉴定与预期目的基因相符。SDS-PAGE显示，IPTG可诱导一分子量约为41 kD的可溶性GST融合蛋白，经GST·BindTM Purification Kit纯化后，纯度可达95%以上。结论本研究成功克隆表达出mpn 668融合蛋白，为下一步研究其功能奠定了基础。
목적：극륭표체여순화폐염지원체mpn 668단백。방법이Mp 129주기인조DNA위모판，PCR법확증목적기인mpn 668，장기아극륭지pGEX-6 P-1재체중。경감정후장기전화지표체균E.coli BL 21중진행유도표체。채용SDS-PAGE화단백질인적등방법대표체산물진행분석감정병순화GST융합단백。결과성공확증출총장도위423 bp적mpn 668기인，소구건적원핵중조질립경PCR、쌍매절이급측서감정여예기목적기인상부。SDS-PAGE현시，IPTG가유도일분자량약위41 kD적가용성GST융합단백，경GST·BindTM Purification Kit순화후，순도가체95%이상。결론본연구성공극륭표체출mpn 668융합단백，위하일보연구기공능전정료기출。