畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
1期
19-24
,共6页
孙志阔%王希春%石念进%汪洋%钟刚%徐同锏%刘芳芳%吴金节
孫誌闊%王希春%石唸進%汪洋%鐘剛%徐同锏%劉芳芳%吳金節
손지활%왕희춘%석념진%왕양%종강%서동간%류방방%오금절
大豆抗原蛋白%纯化%ELISA%抗体
大豆抗原蛋白%純化%ELISA%抗體
대두항원단백%순화%ELISA%항체
soybean antigen protein%purification%ELISA%antibody
旨在建立检测血清大豆抗原蛋白抗体的间接ELISA方法.经琼脂糖凝胶层析纯化大豆抗原蛋白,以不同剂量皮下注射免疫小鼠,采用方阵滴定法确定最佳抗原包被浓度及血清稀释度,并对其他条件进行优化,最终建立检测血清大豆抗原蛋白抗体的间接ELISA方法,利用该方法检测小鼠免疫后血清抗体水平.通过方阵滴定法确定11S蛋白最佳包被浓度为5.0μg/mL,血清稀释倍数为1∶800；7S蛋白抗原最佳包被浓度为2.5 μg/mL,血清稀释倍数为1∶1600；两者的批内、批间系数均小于10％,重复性较好,通过ELISA法确定11S和7S蛋白的最佳免疫次数为2次,免疫剂量为l 000 μg/kg.结果表明本试验初步建立大豆抗原蛋白抗体检测间接ELISA方法,具有很强的特异性、敏感性和重复性,可用于大豆抗原蛋白过敏反应的临床检测.
旨在建立檢測血清大豆抗原蛋白抗體的間接ELISA方法.經瓊脂糖凝膠層析純化大豆抗原蛋白,以不同劑量皮下註射免疫小鼠,採用方陣滴定法確定最佳抗原包被濃度及血清稀釋度,併對其他條件進行優化,最終建立檢測血清大豆抗原蛋白抗體的間接ELISA方法,利用該方法檢測小鼠免疫後血清抗體水平.通過方陣滴定法確定11S蛋白最佳包被濃度為5.0μg/mL,血清稀釋倍數為1∶800；7S蛋白抗原最佳包被濃度為2.5 μg/mL,血清稀釋倍數為1∶1600；兩者的批內、批間繫數均小于10％,重複性較好,通過ELISA法確定11S和7S蛋白的最佳免疫次數為2次,免疫劑量為l 000 μg/kg.結果錶明本試驗初步建立大豆抗原蛋白抗體檢測間接ELISA方法,具有很彊的特異性、敏感性和重複性,可用于大豆抗原蛋白過敏反應的臨床檢測.
지재건립검측혈청대두항원단백항체적간접ELISA방법.경경지당응효층석순화대두항원단백,이불동제량피하주사면역소서,채용방진적정법학정최가항원포피농도급혈청희석도,병대기타조건진행우화,최종건립검측혈청대두항원단백항체적간접ELISA방법,이용해방법검측소서면역후혈청항체수평.통과방진적정법학정11S단백최가포피농도위5.0μg/mL,혈청희석배수위1∶800；7S단백항원최가포피농도위2.5 μg/mL,혈청희석배수위1∶1600；량자적비내、비간계수균소우10％,중복성교호,통과ELISA법학정11S화7S단백적최가면역차수위2차,면역제량위l 000 μg/kg.결과표명본시험초보건립대두항원단백항체검측간접ELISA방법,구유흔강적특이성、민감성화중복성,가용우대두항원단백과민반응적림상검측.
