华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
3期
439-442
,共4页
冯广达%陈美标%羊宋贞%朱红惠
馮廣達%陳美標%羊宋貞%硃紅惠
풍엄체%진미표%양송정%주홍혜
DNA提取%冻融法%16S rRNA基因%PCR
DNA提取%凍融法%16S rRNA基因%PCR
DNA제취%동융법%16S rRNA기인%PCR
DNA extraction%the freeze-thaw method%16S rRNA gene%PCR
以14个属的革兰阴性菌和阳性菌为研究对象,采用16S rRNA基因PCR扩增对4种细菌DNA提取法进行了比较.结果表明,对细菌DNA的提取效果排序,依次为冻融法、煮沸法、碱解法、ROSE法.冻融法效果最好,具有成本低、省时省力、无污染等优点,但仍存在少数革兰阳性菌DNA提取失败的现象.因此,在菌株较多的情况下可先采用冻融法提取细菌DNA,对少数提取失败的菌株,弃冻融法得到的上清液,再以SDS法、CTAB法或DNA试剂盒的提取进行补充.采用该操作流程既能节省成本和时间,又减少了提取过程中有机废弃物的产生.
以14箇屬的革蘭陰性菌和暘性菌為研究對象,採用16S rRNA基因PCR擴增對4種細菌DNA提取法進行瞭比較.結果錶明,對細菌DNA的提取效果排序,依次為凍融法、煮沸法、堿解法、ROSE法.凍融法效果最好,具有成本低、省時省力、無汙染等優點,但仍存在少數革蘭暘性菌DNA提取失敗的現象.因此,在菌株較多的情況下可先採用凍融法提取細菌DNA,對少數提取失敗的菌株,棄凍融法得到的上清液,再以SDS法、CTAB法或DNA試劑盒的提取進行補充.採用該操作流程既能節省成本和時間,又減少瞭提取過程中有機廢棄物的產生.
이14개속적혁란음성균화양성균위연구대상,채용16S rRNA기인PCR확증대4충세균DNA제취법진행료비교.결과표명,대세균DNA적제취효과배서,의차위동융법、자비법、감해법、ROSE법.동융법효과최호,구유성본저、성시성력、무오염등우점,단잉존재소수혁란양성균DNA제취실패적현상.인차,재균주교다적정황하가선채용동융법제취세균DNA,대소수제취실패적균주,기동융법득도적상청액,재이SDS법、CTAB법혹DNA시제합적제취진행보충.채용해조작류정기능절성성본화시간,우감소료제취과정중유궤폐기물적산생.
