CAJ | 학술논문

对金钗石斛Dendrobium nobile进行人工自花授粉,在授粉之后10、20、30、40、45、50和60d分别将工程化根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens EHA105(pCAMBIA1301)直接注射入子房内部.150 d后,金钗石斛蒴果成熟,摘取果实,进行种子β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色、无菌播种、潮霉素筛选以及PCR检测试验.结果表明:子房注射对果实发育具有较大影响,在授粉后10 ～30 d进行子房注射后,果实脱落；在授粉后45 d进行子房注射,成熟果实注射部位的种子GUS染色率最高,可达18％；无菌播种之后,经潮霉素筛选,获得11株幼苗,每株植株均表现出GUS染色反应；随机挑选4株幼苗进行PCR检测,发现均能扩增出预期条带,说明外源基因已经整合到植株基因组内.农杆菌子房注射法在兰科植物转基因的成功应用,可以为兰科植物育种提供一种简单高效的方法.
대금차석곡Dendrobium nobile진행인공자화수분,재수분지후10、20、30、40、45、50화60d분별장공정화근암농간균Agrobacterium tumefaciens EHA105(pCAMBIA1301)직접주사입자방내부.150 d후,금차석곡삭과성숙,적취과실,진행충자β-포도당감산매(GUS)염색、무균파충、조매소사선이급PCR검측시험.결과표명:자방주사대과실발육구유교대영향,재수분후10 ～30 d진행자방주사후,과실탈락；재수분후45 d진행자방주사,성숙과실주사부위적충자GUS염색솔최고,가체18％；무균파충지후,경조매소사선,획득11주유묘,매주식주균표현출GUS염색반응；수궤도선4주유묘진행PCR검측,발현균능확증출예기조대,설명외원기인이경정합도식주기인조내.농간균자방주사법재란과식물전기인적성공응용,가이위란과식물육충제공일충간단고효적방법.