岭南现代临床外科
嶺南現代臨床外科
령남현대림상외과
LINGNAN MODERN CLINICS IN SURGERY
2013年
3期
172-177
,共6页
侯念宗%刘文宙%陈炳豪%陈皓%Aditya%宋卫东
侯唸宗%劉文宙%陳炳豪%陳皓%Aditya%宋衛東
후념종%류문주%진병호%진호%Aditya%송위동
高糖%TNF-α%RAW264.7%破骨细胞%糖尿病足
高糖%TNF-α%RAW264.7%破骨細胞%糖尿病足
고당%TNF-α%RAW264.7%파골세포%당뇨병족
目的 观察高糖及TNF-α的培养条件对RAW264.7细胞向破骨细胞诱导分化的影响.方法 在正常、高糖(30 mmol/L)及TNF-α(10μmol/L)条件下培养RAW264.7细胞后,加入浓度为100 ng/mL的细胞核转录因子κB受体激活物的配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)为诱导剂,诱导RAW264.7向破骨细胞分化;诱导9天后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,比较各组TRAP+细胞数,RT-PCR及Western Blot检测各组破骨细胞标志基因CTR和MMP-9的表达.结果 不同的培养条件下RANKL均能诱导RAW264.7分化为成熟的破骨细胞,其中TNF-α环境中RAW264.7形成的TRAP+阳性细胞数、CTR和MMP-9的表达最高,而在高糖环境下最低.结论 TNF-α可以促进RAW264.7向破骨细胞分化,而高糖对这个过程可能是抑制作用,这一现象符合Ⅰ型和Ⅱ糖尿病患者骨质破坏的表现;高糖及TNF-α的培养条件下RANKL对RAW264.7的作用可模拟糖尿病足病变微环境中OC的诱导分化的过程.
目的 觀察高糖及TNF-α的培養條件對RAW264.7細胞嚮破骨細胞誘導分化的影響.方法 在正常、高糖(30 mmol/L)及TNF-α(10μmol/L)條件下培養RAW264.7細胞後,加入濃度為100 ng/mL的細胞覈轉錄因子κB受體激活物的配體(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)為誘導劑,誘導RAW264.7嚮破骨細胞分化;誘導9天後,抗酒石痠痠性燐痠酶(TRAP)染色,比較各組TRAP+細胞數,RT-PCR及Western Blot檢測各組破骨細胞標誌基因CTR和MMP-9的錶達.結果 不同的培養條件下RANKL均能誘導RAW264.7分化為成熟的破骨細胞,其中TNF-α環境中RAW264.7形成的TRAP+暘性細胞數、CTR和MMP-9的錶達最高,而在高糖環境下最低.結論 TNF-α可以促進RAW264.7嚮破骨細胞分化,而高糖對這箇過程可能是抑製作用,這一現象符閤Ⅰ型和Ⅱ糖尿病患者骨質破壞的錶現;高糖及TNF-α的培養條件下RANKL對RAW264.7的作用可模擬糖尿病足病變微環境中OC的誘導分化的過程.
목적 관찰고당급TNF-α적배양조건대RAW264.7세포향파골세포유도분화적영향.방법 재정상、고당(30 mmol/L)급TNF-α(10μmol/L)조건하배양RAW264.7세포후,가입농도위100 ng/mL적세포핵전록인자κB수체격활물적배체(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)위유도제,유도RAW264.7향파골세포분화;유도9천후,항주석산산성린산매(TRAP)염색,비교각조TRAP+세포수,RT-PCR급Western Blot검측각조파골세포표지기인CTR화MMP-9적표체.결과 불동적배양조건하RANKL균능유도RAW264.7분화위성숙적파골세포,기중TNF-α배경중RAW264.7형성적TRAP+양성세포수、CTR화MMP-9적표체최고,이재고당배경하최저.결론 TNF-α가이촉진RAW264.7향파골세포분화,이고당대저개과정가능시억제작용,저일현상부합Ⅰ형화Ⅱ당뇨병환자골질파배적표현;고당급TNF-α적배양조건하RANKL대RAW264.7적작용가모의당뇨병족병변미배경중OC적유도분화적과정.