中国神经免疫学和神经病学杂志
中國神經免疫學和神經病學雜誌
중국신경면역학화신경병학잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROIMMUNOLOGY AND
2013年
4期
267-273
,共7页
赵俊暕%陈乃耀%石峻%王沂%孟爱国%韩晓燕%赵辉
趙俊暕%陳迺耀%石峻%王沂%孟愛國%韓曉燕%趙輝
조준간%진내요%석준%왕기%맹애국%한효연%조휘
人脐血间充质干细胞%创伤性脑损伤%VEGF%VEGF-R2%血管新生
人臍血間充質榦細胞%創傷性腦損傷%VEGF%VEGF-R2%血管新生
인제혈간충질간세포%창상성뇌손상%VEGF%VEGF-R2%혈관신생
HUCBMSCs%traumatic brain injury%VEGF%VEGF-R2%angiogenesis
目的 探讨人脐血间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠创伤性脑损伤(TBI)模型的脑保护作用机制.方法 大鼠随机分为假手术组、损伤对照组(对照组)和实验组,每组30只.对实验组和对照组采用改良Feeney 自由落体方法制作大鼠TBI模型.假手术组只开骨窗,不撞击硬脑膜.造模操作后24 h,实验组所有大鼠均经鼠尾静脉注入用Brdu标记的3×106个/mL MSCs(以1 mL PBS液溶解)1 mL;对照组和假手术组所有大鼠经鼠尾静脉注入等体积的PBS液.3组大鼠均未使用免疫抑制剂.以神经损伤严重缺损评分(NSS)方法评价各组大鼠神经损伤程度；各组大鼠注射后第3、7、14、21、28天,采用HE染色观察脑损伤周边区组织形态学变化,免疫组化方法观察损伤周边区Brdu阳性的MSCs分布、微血管密度及VEGF、VEGF-R2表达,原位杂交方法观察VEGF mRNA表达,并进行比较.结果 实验组大鼠均未发现免疫排斥反应.注射后第7、14、21、28天实验组大鼠NSS评分均低于对照组(P＜0.05).光镜下假手术组大鼠脑组织细胞结构基本正常；对照组大鼠脑组织结构破坏,损伤区可见大量坏死细胞,胞核皱缩,细胞结构消失.实验组脑组织坏死范围缩小,细胞结构较对照组完整,核固缩较对照组明显减轻.Brdu阳性的MSCs在实验组大鼠脑损伤周边区明显聚集,4周后仍可见存活MSCs.实验组大鼠脑损伤周边区有较多单个血管内皮细胞和条索状的血管样结构,各时间点实验组MVD值均高于对照组(P＜0.01)；注射后各时间点实验组在损伤周边区表达细胞因子VEGF、VEGF-R2和VEGF mRNA的细胞计数均较对照组明显增多(P＜0.05).对照组和实验组因子VEGF、VEGF-R2和VEGFmRNA 表达水平均分别在注射后第7、3、3天达高峰,此后对照组表达逐渐减弱,实验组第21天、甚至28天因子表达仍维持较高水平.结论 在未应用免疫抑制剂的情况下,经尾静脉注射的MSCs可迁移至免疫功能健全的大鼠脑创伤灶周边区,促进VEGF、VEGF-R2和VEGF mRNA表达及血管新生,利于神经功能修复.
目的 探討人臍血間充質榦細胞(MSCs)移植對大鼠創傷性腦損傷(TBI)模型的腦保護作用機製.方法 大鼠隨機分為假手術組、損傷對照組(對照組)和實驗組,每組30隻.對實驗組和對照組採用改良Feeney 自由落體方法製作大鼠TBI模型.假手術組隻開骨窗,不撞擊硬腦膜.造模操作後24 h,實驗組所有大鼠均經鼠尾靜脈註入用Brdu標記的3×106箇/mL MSCs(以1 mL PBS液溶解)1 mL;對照組和假手術組所有大鼠經鼠尾靜脈註入等體積的PBS液.3組大鼠均未使用免疫抑製劑.以神經損傷嚴重缺損評分(NSS)方法評價各組大鼠神經損傷程度；各組大鼠註射後第3、7、14、21、28天,採用HE染色觀察腦損傷週邊區組織形態學變化,免疫組化方法觀察損傷週邊區Brdu暘性的MSCs分佈、微血管密度及VEGF、VEGF-R2錶達,原位雜交方法觀察VEGF mRNA錶達,併進行比較.結果 實驗組大鼠均未髮現免疫排斥反應.註射後第7、14、21、28天實驗組大鼠NSS評分均低于對照組(P＜0.05).光鏡下假手術組大鼠腦組織細胞結構基本正常；對照組大鼠腦組織結構破壞,損傷區可見大量壞死細胞,胞覈皺縮,細胞結構消失.實驗組腦組織壞死範圍縮小,細胞結構較對照組完整,覈固縮較對照組明顯減輕.Brdu暘性的MSCs在實驗組大鼠腦損傷週邊區明顯聚集,4週後仍可見存活MSCs.實驗組大鼠腦損傷週邊區有較多單箇血管內皮細胞和條索狀的血管樣結構,各時間點實驗組MVD值均高于對照組(P＜0.01)；註射後各時間點實驗組在損傷週邊區錶達細胞因子VEGF、VEGF-R2和VEGF mRNA的細胞計數均較對照組明顯增多(P＜0.05).對照組和實驗組因子VEGF、VEGF-R2和VEGFmRNA 錶達水平均分彆在註射後第7、3、3天達高峰,此後對照組錶達逐漸減弱,實驗組第21天、甚至28天因子錶達仍維持較高水平.結論 在未應用免疫抑製劑的情況下,經尾靜脈註射的MSCs可遷移至免疫功能健全的大鼠腦創傷竈週邊區,促進VEGF、VEGF-R2和VEGF mRNA錶達及血管新生,利于神經功能脩複.
목적 탐토인제혈간충질간세포(MSCs)이식대대서창상성뇌손상(TBI)모형적뇌보호작용궤제.방법 대서수궤분위가수술조、손상대조조(대조조)화실험조,매조30지.대실험조화대조조채용개량Feeney 자유락체방법제작대서TBI모형.가수술조지개골창,불당격경뇌막.조모조작후24 h,실험조소유대서균경서미정맥주입용Brdu표기적3×106개/mL MSCs(이1 mL PBS액용해)1 mL;대조조화가수술조소유대서경서미정맥주입등체적적PBS액.3조대서균미사용면역억제제.이신경손상엄중결손평분(NSS)방법평개각조대서신경손상정도；각조대서주사후제3、7、14、21、28천,채용HE염색관찰뇌손상주변구조직형태학변화,면역조화방법관찰손상주변구Brdu양성적MSCs분포、미혈관밀도급VEGF、VEGF-R2표체,원위잡교방법관찰VEGF mRNA표체,병진행비교.결과 실험조대서균미발현면역배척반응.주사후제7、14、21、28천실험조대서NSS평분균저우대조조(P＜0.05).광경하가수술조대서뇌조직세포결구기본정상；대조조대서뇌조직결구파배,손상구가견대량배사세포,포핵추축,세포결구소실.실험조뇌조직배사범위축소,세포결구교대조조완정,핵고축교대조조명현감경.Brdu양성적MSCs재실험조대서뇌손상주변구명현취집,4주후잉가견존활MSCs.실험조대서뇌손상주변구유교다단개혈관내피세포화조색상적혈관양결구,각시간점실험조MVD치균고우대조조(P＜0.01)；주사후각시간점실험조재손상주변구표체세포인자VEGF、VEGF-R2화VEGF mRNA적세포계수균교대조조명현증다(P＜0.05).대조조화실험조인자VEGF、VEGF-R2화VEGFmRNA 표체수평균분별재주사후제7、3、3천체고봉,차후대조조표체축점감약,실험조제21천、심지28천인자표체잉유지교고수평.결론 재미응용면역억제제적정황하,경미정맥주사적MSCs가천이지면역공능건전적대서뇌창상조주변구,촉진VEGF、VEGF-R2화VEGF mRNA표체급혈관신생,리우신경공능수복.
