中国神经免疫学和神经病学杂志
中國神經免疫學和神經病學雜誌
중국신경면역학화신경병학잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROIMMUNOLOGY AND
2013年
4期
263-266
,共4页
谢甬淋%戚飞腾%童洋萍%毕涌%张旭
謝甬淋%慼飛騰%童洋萍%畢湧%張旭
사용림%척비등%동양평%필용%장욱
人脂肪间充质干细胞%流式细胞仪%冻存%分离%生物学特征
人脂肪間充質榦細胞%流式細胞儀%凍存%分離%生物學特徵
인지방간충질간세포%류식세포의%동존%분리%생물학특정
human adipose-derived mesenchymal stem cells%flow cytometry%cryopreserved%isolate%biological characteristics
目的 有效地分离并扩增人脂肪间充质干细胞(hADSCs),并观察冻存前后hADSCs的一般生物学特征.方法 采用Ⅰ型胶原酶消化的方法从抽脂手术废弃的脂肪组织中分离hADSCs,接种在人脂肪间充质干细胞完全培养基中培养.采用胰酶消化法传代扩增,取处于生长对数期的第3代细胞,以液氮冻存6个月.复苏后以台盼蓝染色检测细胞存活率,MTT法描绘细胞生长曲线；以流式细胞仪检测冻存前后细胞表面分子CD44、CD105、CD29、CD73、CD31、HLA-DR的表达水平.结果 细胞大小均等,呈长梭形漩涡状生长.复苏后细胞存活率可达(91.25±3.02)％；冻存前后细胞生长曲线无明显差别,均呈“S”形；经过2～3 d潜伏期后进入增殖期,7d后进入平台期.冻存前CD44、CD105双阳性细胞占(99.850±0.001)％,CD29、CD73双阳性细胞占(92.600±0.028)％,CD31阳性细胞占(4.186±0.010)％,HLA-DR阳性细胞占(1.02±0.007)％；冻存后CD44、CD105双阳性细胞占(98.060±0.028)％,CD29、CD73双阳性细胞占(91.224士0.041)％,CD31阳性细胞占(3.832±0.009)％,HLA-DR阳性细胞占(1.514±0.006)％.冻存前后上述6种hADSCs表面分子表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 来源于人的脂肪间充质干细胞易于体外培养扩增和冻存,复苏后存活率高,一般生物学特征无明显变化,可用作组织工程的种子细胞.
目的 有效地分離併擴增人脂肪間充質榦細胞(hADSCs),併觀察凍存前後hADSCs的一般生物學特徵.方法 採用Ⅰ型膠原酶消化的方法從抽脂手術廢棄的脂肪組織中分離hADSCs,接種在人脂肪間充質榦細胞完全培養基中培養.採用胰酶消化法傳代擴增,取處于生長對數期的第3代細胞,以液氮凍存6箇月.複囌後以檯盼藍染色檢測細胞存活率,MTT法描繪細胞生長麯線；以流式細胞儀檢測凍存前後細胞錶麵分子CD44、CD105、CD29、CD73、CD31、HLA-DR的錶達水平.結果 細胞大小均等,呈長梭形漩渦狀生長.複囌後細胞存活率可達(91.25±3.02)％；凍存前後細胞生長麯線無明顯差彆,均呈“S”形；經過2～3 d潛伏期後進入增殖期,7d後進入平檯期.凍存前CD44、CD105雙暘性細胞佔(99.850±0.001)％,CD29、CD73雙暘性細胞佔(92.600±0.028)％,CD31暘性細胞佔(4.186±0.010)％,HLA-DR暘性細胞佔(1.02±0.007)％；凍存後CD44、CD105雙暘性細胞佔(98.060±0.028)％,CD29、CD73雙暘性細胞佔(91.224士0.041)％,CD31暘性細胞佔(3.832±0.009)％,HLA-DR暘性細胞佔(1.514±0.006)％.凍存前後上述6種hADSCs錶麵分子錶達水平差異均無統計學意義(P＞0.05).結論 來源于人的脂肪間充質榦細胞易于體外培養擴增和凍存,複囌後存活率高,一般生物學特徵無明顯變化,可用作組織工程的種子細胞.
목적 유효지분리병확증인지방간충질간세포(hADSCs),병관찰동존전후hADSCs적일반생물학특정.방법 채용Ⅰ형효원매소화적방법종추지수술폐기적지방조직중분리hADSCs,접충재인지방간충질간세포완전배양기중배양.채용이매소화법전대확증,취처우생장대수기적제3대세포,이액담동존6개월.복소후이태반람염색검측세포존활솔,MTT법묘회세포생장곡선；이류식세포의검측동존전후세포표면분자CD44、CD105、CD29、CD73、CD31、HLA-DR적표체수평.결과 세포대소균등,정장사형선와상생장.복소후세포존활솔가체(91.25±3.02)％；동존전후세포생장곡선무명현차별,균정“S”형；경과2～3 d잠복기후진입증식기,7d후진입평태기.동존전CD44、CD105쌍양성세포점(99.850±0.001)％,CD29、CD73쌍양성세포점(92.600±0.028)％,CD31양성세포점(4.186±0.010)％,HLA-DR양성세포점(1.02±0.007)％；동존후CD44、CD105쌍양성세포점(98.060±0.028)％,CD29、CD73쌍양성세포점(91.224사0.041)％,CD31양성세포점(3.832±0.009)％,HLA-DR양성세포점(1.514±0.006)％.동존전후상술6충hADSCs표면분자표체수평차이균무통계학의의(P＞0.05).결론 래원우인적지방간충질간세포역우체외배양확증화동존,복소후존활솔고,일반생물학특정무명현변화,가용작조직공정적충자세포.
