作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2013年
4期
744-752
,共9页
谢小玉%张兵%张霞%马仲炼%李加纳
謝小玉%張兵%張霞%馬仲煉%李加納
사소옥%장병%장하%마중련%리가납
油菜%抑制差减杂交%干旱胁迫%cDNA文库%表达序列标签
油菜%抑製差減雜交%榦旱脅迫%cDNA文庫%錶達序列標籤
유채%억제차감잡교%간한협박%cDNA문고%표체서렬표첨
Rapeseed (Brassica napus L.)%Suppression subtractive hybridization (SSH)%Drought stress%cDNA library%Express sequence tag
以抗旱能力强的油菜Holiday为材料,以干旱处理的样品为Tester,正常水分管理(对照)为Driver构建干旱诱导的甘蓝型油菜叶片正向抑制性消减杂交(SSH)文库.随机挑选24个阳性克隆进行PCR验证,结果表明,其中23个含有插入片段,平均大小在750 bp左右.将96个阳性克隆测序,运用CAP3 Sequence Assembly Program聚类、拼接和去除冗余,获得重叠群4条,单拷贝序列82条,平均长度为542 bp.经BlastX程序比对蛋白数据库发现,11条EST没有找到同源性序列,75条有同源序列.KOBAS分析发现,28条EST被定位到67条代谢途径中,根据P值推测,光合中的碳固定、有氧呼吸的电子供体、氮代谢、乙醛酸和二羧酸代谢在植物干旱胁迫中发挥着极为重要的作用.这些EST涉及到的功能中所占比例最大的分别是细胞器(58.82%)、结合(30.77%)和新陈代谢过程(43.72%),表明甘蓝型油菜受到干旱胁迫时,细胞器组件上的功能发挥了重要的作用,结合基因和蛋白被激活,加强了新陈代谢.
以抗旱能力彊的油菜Holiday為材料,以榦旱處理的樣品為Tester,正常水分管理(對照)為Driver構建榦旱誘導的甘藍型油菜葉片正嚮抑製性消減雜交(SSH)文庫.隨機挑選24箇暘性剋隆進行PCR驗證,結果錶明,其中23箇含有插入片段,平均大小在750 bp左右.將96箇暘性剋隆測序,運用CAP3 Sequence Assembly Program聚類、拼接和去除冗餘,穫得重疊群4條,單拷貝序列82條,平均長度為542 bp.經BlastX程序比對蛋白數據庫髮現,11條EST沒有找到同源性序列,75條有同源序列.KOBAS分析髮現,28條EST被定位到67條代謝途徑中,根據P值推測,光閤中的碳固定、有氧呼吸的電子供體、氮代謝、乙醛痠和二羧痠代謝在植物榦旱脅迫中髮揮著極為重要的作用.這些EST涉及到的功能中所佔比例最大的分彆是細胞器(58.82%)、結閤(30.77%)和新陳代謝過程(43.72%),錶明甘藍型油菜受到榦旱脅迫時,細胞器組件上的功能髮揮瞭重要的作用,結閤基因和蛋白被激活,加彊瞭新陳代謝.
이항한능력강적유채Holiday위재료,이간한처리적양품위Tester,정상수분관리(대조)위Driver구건간한유도적감람형유채협편정향억제성소감잡교(SSH)문고.수궤도선24개양성극륭진행PCR험증,결과표명,기중23개함유삽입편단,평균대소재750 bp좌우.장96개양성극륭측서,운용CAP3 Sequence Assembly Program취류、병접화거제용여,획득중첩군4조,단고패서렬82조,평균장도위542 bp.경BlastX정서비대단백수거고발현,11조EST몰유조도동원성서렬,75조유동원서렬.KOBAS분석발현,28조EST피정위도67조대사도경중,근거P치추측,광합중적탄고정、유양호흡적전자공체、담대사、을철산화이최산대사재식물간한협박중발휘착겁위중요적작용.저사EST섭급도적공능중소점비례최대적분별시세포기(58.82%)、결합(30.77%)화신진대사과정(43.72%),표명감람형유채수도간한협박시,세포기조건상적공능발휘료중요적작용,결합기인화단백피격활,가강료신진대사.