国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2013年
12期
1489-1493,1496
,共6页
金萍%肖克林%熊礼宽%卢月梅%吴劲松%吴丽娟%招悦%刘纯义
金萍%肖剋林%熊禮寬%盧月梅%吳勁鬆%吳麗娟%招悅%劉純義
금평%초극림%웅례관%로월매%오경송%오려연%초열%류순의
聚合酶链反应%核酸杂交%鲍氏不动杆菌%多重药物流出泵基因
聚閤酶鏈反應%覈痠雜交%鮑氏不動桿菌%多重藥物流齣泵基因
취합매련반응%핵산잡교%포씨불동간균%다중약물류출빙기인
目的 建立一种新的多重PCR和反向线点杂交技术(mPCR-RLB)快速同时检测鲍曼不动杆菌21个主动外排基因的方法并评价其临床应用价值.方法 根据GenBank中收录的多重耐药鲍曼不动杆菌AYE株5个外排泵蛋白基因家族,选取其中21个基因(4个来自MFS家族,13个来自RND家族,2个来自MATE家族,1个来自SMR家族,1个来自ABC家族).设计22对引物及寡核苷酸探针(1对鲍曼不动杆菌通用引物及探针),mPCR同时扩增22个目的 基因,PCR产物再与固定在尼龙膜上的特异性寡核苷酸探针反向线点杂交,同时检测上述22个基因.用该法对40株经过鉴定的鲍曼不动杆菌进行检测.结果 除cmlA5和cmlA基因未检出阳性外,其余19个外排泵基因均呈阳性.除第16号菌株外排泵基因检测阴性外,其余39株鲍曼不动杆菌临床株携带外排泵基因数量从5～18个不等.外排系统在多重耐药菌株及相对敏感菌株中均有分布.11个外排泵基因在多重耐药鲍曼不动杆菌菌株中阳性率明显高于敏感株,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 建立的mPCR-RLB技术可快速同时检测鲍曼不动杆菌多个外排泵基因,短时间内明确菌株携带外排泵基因情况,对明确其多重耐药性的发生机制、避免药物成为外排泵对象、找到更有效的特异外排系统抑制剂均有重要意义.
目的 建立一種新的多重PCR和反嚮線點雜交技術(mPCR-RLB)快速同時檢測鮑曼不動桿菌21箇主動外排基因的方法併評價其臨床應用價值.方法 根據GenBank中收錄的多重耐藥鮑曼不動桿菌AYE株5箇外排泵蛋白基因傢族,選取其中21箇基因(4箇來自MFS傢族,13箇來自RND傢族,2箇來自MATE傢族,1箇來自SMR傢族,1箇來自ABC傢族).設計22對引物及寡覈苷痠探針(1對鮑曼不動桿菌通用引物及探針),mPCR同時擴增22箇目的 基因,PCR產物再與固定在尼龍膜上的特異性寡覈苷痠探針反嚮線點雜交,同時檢測上述22箇基因.用該法對40株經過鑒定的鮑曼不動桿菌進行檢測.結果 除cmlA5和cmlA基因未檢齣暘性外,其餘19箇外排泵基因均呈暘性.除第16號菌株外排泵基因檢測陰性外,其餘39株鮑曼不動桿菌臨床株攜帶外排泵基因數量從5～18箇不等.外排繫統在多重耐藥菌株及相對敏感菌株中均有分佈.11箇外排泵基因在多重耐藥鮑曼不動桿菌菌株中暘性率明顯高于敏感株,差異具有統計學意義(P＜0.05).結論 建立的mPCR-RLB技術可快速同時檢測鮑曼不動桿菌多箇外排泵基因,短時間內明確菌株攜帶外排泵基因情況,對明確其多重耐藥性的髮生機製、避免藥物成為外排泵對象、找到更有效的特異外排繫統抑製劑均有重要意義.
목적 건립일충신적다중PCR화반향선점잡교기술(mPCR-RLB)쾌속동시검측포만불동간균21개주동외배기인적방법병평개기림상응용개치.방법 근거GenBank중수록적다중내약포만불동간균AYE주5개외배빙단백기인가족,선취기중21개기인(4개래자MFS가족,13개래자RND가족,2개래자MATE가족,1개래자SMR가족,1개래자ABC가족).설계22대인물급과핵감산탐침(1대포만불동간균통용인물급탐침),mPCR동시확증22개목적 기인,PCR산물재여고정재니룡막상적특이성과핵감산탐침반향선점잡교,동시검측상술22개기인.용해법대40주경과감정적포만불동간균진행검측.결과 제cmlA5화cmlA기인미검출양성외,기여19개외배빙기인균정양성.제제16호균주외배빙기인검측음성외,기여39주포만불동간균림상주휴대외배빙기인수량종5～18개불등.외배계통재다중내약균주급상대민감균주중균유분포.11개외배빙기인재다중내약포만불동간균균주중양성솔명현고우민감주,차이구유통계학의의(P＜0.05).결론 건립적mPCR-RLB기술가쾌속동시검측포만불동간균다개외배빙기인,단시간내명학균주휴대외배빙기인정황,대명학기다중내약성적발생궤제、피면약물성위외배빙대상、조도경유효적특이외배계통억제제균유중요의의.
