江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
3期
179-183
,共5页
水燕%管政兵%赵朝阳%徐增洪%周鑫
水燕%管政兵%趙朝暘%徐增洪%週鑫
수연%관정병%조조양%서증홍%주흠
克氏原螯虾%卵巢发育%蛋白质组学
剋氏原螯蝦%卵巢髮育%蛋白質組學
극씨원오하%란소발육%단백질조학
克氏原螯虾作为经济虾蟹类的重要代表,是淡水虾类重要水产养殖资源.目前在规模化养殖过程中优质苗种的供应短缺现状,是制约克氏原螯虾产业发展的瓶颈之一.人工养殖条件下,雌虾卵巢易出现发育迟缓甚至停滞现象而导致雌、雄性腺发育不同步是优质苗种短缺的首要根本原因.分析可知,克氏原螯虾卵巢从卵黄发生前期(Ⅲ期)到卵黄发生期(Ⅳ期)的发育过渡是卵母细胞能否顺利发育成熟的关键点.本研究对克氏原螯虾卵巢发育Ⅲ期和Ⅳ期卵巢组织总蛋白质组双向电泳的等电聚焦条件、上样量等关键因素进行了优化,运用PDQuestTM软件对获得的凝胶图谱进行了图像分析,并对表达差异蛋白质点(丰度差异≥2倍)进行了串联质谱鉴定.结果显示:在等电总伏特数不低于8500V·h、样品上样量为200 μg时,可以获得较清晰的凝胶图谱；利用串联质谱分析挖取的52个差异蛋白质点,其中共成功鉴定29个(包括22种蛋白质)；分析表明,相对于发育Ⅲ期卵巢蛋白质组,在Ⅳ期卵巢蛋白质组中有13种蛋白质表达量有下调,9种蛋白质表达量有上调.研究结果将对于揭示克氏原螯虾的卵巢发育分子调控机制奠定一定基础,同时对于了解其他虾蟹类动物的性腺发育机理也将积累重要分子生物学资料.
剋氏原螯蝦作為經濟蝦蟹類的重要代錶,是淡水蝦類重要水產養殖資源.目前在規模化養殖過程中優質苗種的供應短缺現狀,是製約剋氏原螯蝦產業髮展的瓶頸之一.人工養殖條件下,雌蝦卵巢易齣現髮育遲緩甚至停滯現象而導緻雌、雄性腺髮育不同步是優質苗種短缺的首要根本原因.分析可知,剋氏原螯蝦卵巢從卵黃髮生前期(Ⅲ期)到卵黃髮生期(Ⅳ期)的髮育過渡是卵母細胞能否順利髮育成熟的關鍵點.本研究對剋氏原螯蝦卵巢髮育Ⅲ期和Ⅳ期卵巢組織總蛋白質組雙嚮電泳的等電聚焦條件、上樣量等關鍵因素進行瞭優化,運用PDQuestTM軟件對穫得的凝膠圖譜進行瞭圖像分析,併對錶達差異蛋白質點(豐度差異≥2倍)進行瞭串聯質譜鑒定.結果顯示:在等電總伏特數不低于8500V·h、樣品上樣量為200 μg時,可以穫得較清晰的凝膠圖譜；利用串聯質譜分析挖取的52箇差異蛋白質點,其中共成功鑒定29箇(包括22種蛋白質)；分析錶明,相對于髮育Ⅲ期卵巢蛋白質組,在Ⅳ期卵巢蛋白質組中有13種蛋白質錶達量有下調,9種蛋白質錶達量有上調.研究結果將對于揭示剋氏原螯蝦的卵巢髮育分子調控機製奠定一定基礎,同時對于瞭解其他蝦蟹類動物的性腺髮育機理也將積纍重要分子生物學資料.
극씨원오하작위경제하해류적중요대표,시담수하류중요수산양식자원.목전재규모화양식과정중우질묘충적공응단결현상,시제약극씨원오하산업발전적병경지일.인공양식조건하,자하란소역출현발육지완심지정체현상이도치자、웅성선발육불동보시우질묘충단결적수요근본원인.분석가지,극씨원오하란소종란황발생전기(Ⅲ기)도란황발생기(Ⅳ기)적발육과도시란모세포능부순리발육성숙적관건점.본연구대극씨원오하란소발육Ⅲ기화Ⅳ기란소조직총단백질조쌍향전영적등전취초조건、상양량등관건인소진행료우화,운용PDQuestTM연건대획득적응효도보진행료도상분석,병대표체차이단백질점(봉도차이≥2배)진행료천련질보감정.결과현시:재등전총복특수불저우8500V·h、양품상양량위200 μg시,가이획득교청석적응효도보；이용천련질보분석알취적52개차이단백질점,기중공성공감정29개(포괄22충단백질)；분석표명,상대우발육Ⅲ기란소단백질조,재Ⅳ기란소단백질조중유13충단백질표체량유하조,9충단백질표체량유상조.연구결과장대우게시극씨원오하적란소발육분자조공궤제전정일정기출,동시대우료해기타하해류동물적성선발육궤리야장적루중요분자생물학자료.
