食品与生物技术学报
食品與生物技術學報
식품여생물기술학보
JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY
2013年
7期
686-691
,共6页
陈忠法%唐存多%汪俊卿%吴静%邬敏辰
陳忠法%唐存多%汪俊卿%吳靜%鄔敏辰
진충법%당존다%왕준경%오정%오민신
米曲霉%木聚糖酶%二硫键%热稳定性%定点突变
米麯黴%木聚糖酶%二硫鍵%熱穩定性%定點突變
미곡매%목취당매%이류건%열은정성%정점돌변
A spergillus oryzae%xylanase%disulfide bridge%thermostability%site-directed mutagenesis
为提高源自米曲霉Aspergillus oryzae 11家族木聚糖酶(AoXyn11A)的热稳定性,对其相关的氨基酸残基进行定点突变改造.通过对野生型酶AoXyn11A和一种超耐热酶EvXyn11Ts的N端氨基酸残基序列进行同源比较,在野生型酶N端引入一个二硫键,获得突变酶AoXyn11AM.野生型酶和突变酶的热稳定性通过同源建模和分子动力学模拟分析评估后,其基因分别在毕赤酵母GS115中进行表达并分析温度对表达产物酶活性的影响.结果表明:突变酶的最适温度由野生型酶的55℃提高至60℃;在50℃和55℃保温30 min,突变酶保留94％和45％保温处理前的酶活性,分别较野生型酶(62.5％和1.4％)有大幅度的提高.突变酶在保留了野生酶其它优良性质的基础上,提高了热稳定性,具有潜在的工业应用价值.
為提高源自米麯黴Aspergillus oryzae 11傢族木聚糖酶(AoXyn11A)的熱穩定性,對其相關的氨基痠殘基進行定點突變改造.通過對野生型酶AoXyn11A和一種超耐熱酶EvXyn11Ts的N耑氨基痠殘基序列進行同源比較,在野生型酶N耑引入一箇二硫鍵,穫得突變酶AoXyn11AM.野生型酶和突變酶的熱穩定性通過同源建模和分子動力學模擬分析評估後,其基因分彆在畢赤酵母GS115中進行錶達併分析溫度對錶達產物酶活性的影響.結果錶明:突變酶的最適溫度由野生型酶的55℃提高至60℃;在50℃和55℃保溫30 min,突變酶保留94％和45％保溫處理前的酶活性,分彆較野生型酶(62.5％和1.4％)有大幅度的提高.突變酶在保留瞭野生酶其它優良性質的基礎上,提高瞭熱穩定性,具有潛在的工業應用價值.
위제고원자미곡매Aspergillus oryzae 11가족목취당매(AoXyn11A)적열은정성,대기상관적안기산잔기진행정점돌변개조.통과대야생형매AoXyn11A화일충초내열매EvXyn11Ts적N단안기산잔기서렬진행동원비교,재야생형매N단인입일개이류건,획득돌변매AoXyn11AM.야생형매화돌변매적열은정성통과동원건모화분자동역학모의분석평고후,기기인분별재필적효모GS115중진행표체병분석온도대표체산물매활성적영향.결과표명:돌변매적최괄온도유야생형매적55℃제고지60℃;재50℃화55℃보온30 min,돌변매보류94％화45％보온처리전적매활성,분별교야생형매(62.5％화1.4％)유대폭도적제고.돌변매재보류료야생매기타우량성질적기출상,제고료열은정성,구유잠재적공업응용개치.
