CAJ | 학술논문

为了调查引起鱼类运动型气单胞菌败血症(俗称暴发病)的嗜水气单胞菌的遗传多样性和毒力特征,阐明其流行规律,研究于2006-2009年度从湖北省内3个不同地区的6个发病鱼塘中分离了30株嗜水气单胞菌,其中20株为临床株(分离自血液、肝脏、肾脏或腹水),6株为肠道株,4株为池水株.基于所有菌株gyrB基因序列,构建了系统发育树；通过ERIC (Enterobacterial repetitive intergenic consensus,肠道细菌基因间重复序列)指纹图谱进行菌株的遗传分型；用PCR方法检测了7个毒力基因在菌株中的分布模式.这7个基因包括气溶素(aerA)、溶血素(hlyA)、热不稳定性细胞兴奋性肠毒素(alt)、热稳定性细胞兴奋性肠毒素(ast、弹性蛋白酶(ahpB)、脂酶(lip)和鞭毛基因(fla).此外,以斑马鱼为感染对象,通过腹腔注射测定了15株代表菌株的毒力.结果表明:不同来源的20株临床株、1株肠道株和3株池水株具有相同的遗传特性,体现为在系统树上聚为一枝,序列相似性为100％,具有相同的ERIC指纹图谱,毒力基因分布模式为:aerA+hlyA+alt+ast+ahpB+lip+ fla+,且均为强毒株(LD50＜ 9.74×104cfu/尾).与临床株相比,其余5株肠道株和l株池水株或具有不同的ERIC指纹图谱或具有不同的毒力基因分布模式,显示出了遗传多样性,且毒力均弱于临床株(LD50＞ 1.01×106cfu/尾).这说明在一定时间、一定区域内,作为暴发病病原的嗜水气单胞菌为同一克隆系在流行,不存在明显的变异或遗传多样性.此结果有助于阐明嗜水气单胞菌引起的暴发病的流行规律,制定相应的防御措施.多种毒力基因在致病性菌株中的联合流行为发病机理的解析奠定了基础.此外,鉴于毒力基因谱与致病性之间的相关性,表明毒力基因可作为标记基因,用于致病性菌株的检测.
위료조사인기어류운동형기단포균패혈증(속칭폭발병)적기수기단포균적유전다양성화독력특정,천명기류행규률,연구우2006-2009년도종호북성내3개불동지구적6개발병어당중분리료30주기수기단포균,기중20주위림상주(분리자혈액、간장、신장혹복수),6주위장도주,4주위지수주.기우소유균주gyrB기인서렬,구건료계통발육수；통과ERIC (Enterobacterial repetitive intergenic consensus,장도세균기인간중복서렬)지문도보진행균주적유전분형；용PCR방법검측료7개독력기인재균주중적분포모식.저7개기인포괄기용소(aerA)、용혈소(hlyA)、열불은정성세포흥강성장독소(alt)、열은정성세포흥강성장독소(ast、탄성단백매(ahpB)、지매(lip)화편모기인(fla).차외,이반마어위감염대상,통과복강주사측정료15주대표균주적독력.결과표명:불동래원적20주림상주、1주장도주화3주지수주구유상동적유전특성,체현위재계통수상취위일지,서렬상사성위100％,구유상동적ERIC지문도보,독력기인분포모식위:aerA+hlyA+alt+ast+ahpB+lip+ fla+,차균위강독주(LD50＜ 9.74×104cfu/미).여림상주상비,기여5주장도주화l주지수주혹구유불동적ERIC지문도보혹구유불동적독력기인분포모식,현시출료유전다양성,차독력균약우림상주(LD50＞ 1.01×106cfu/미).저설명재일정시간、일정구역내,작위폭발병병원적기수기단포균위동일극륭계재류행,불존재명현적변이혹유전다양성.차결과유조우천명기수기단포균인기적폭발병적류행규률,제정상응적방어조시.다충독력기인재치병성균주중적연합류행위발병궤리적해석전정료기출.차외,감우독력기인보여치병성지간적상관성,표명독력기인가작위표기기인,용우치병성균주적검측.