中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
6期
649-652
,共4页
胥亚%许国莹%周红%解鸿翔%夏龙飞%刘敬敬%张晓蕾
胥亞%許國瑩%週紅%解鴻翔%夏龍飛%劉敬敬%張曉蕾
서아%허국형%주홍%해홍상%하룡비%류경경%장효뢰
β2GP Ⅰ%杂交瘤细胞株%单克隆抗体%抗磷脂综合征
β2GP Ⅰ%雜交瘤細胞株%單剋隆抗體%抗燐脂綜閤徵
β2GP Ⅰ%잡교류세포주%단극륭항체%항린지종합정
β2GP Ⅰ%Hybridoma cell%Monoclonal antibody%Antiphospholipid syndrome
目的:制备β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)单克隆抗体(MAbs),并鉴定抗体的特性.方法:以纯化的人血浆β2GP Ⅰ免疫BALB/c小鼠,采用PEG融合技术,间接ELISA法和有限稀释法,制备和筛选杂交瘤细胞.杂交瘤细胞继续扩大培养后注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水,经硫酸铵沉淀及Protein G纯化MAbs.秋水仙素阻抑法鉴定杂交瘤细胞株染色体数目,ELISA测定滴度,Ig亚类试剂盒鉴定Ig亚类,Western blot鉴定特异性.结果:获得1株稳定分泌MAbs的杂交瘤细胞株β2,该杂交瘤细胞株的染色体数为99 ～108.进一步研究发现,其培养液和腹水滴度为1∶29和1∶215,其MAbs分类为IgG1/κ,Western blot 显示纯化的MAbs及标准anti-β2GP Ⅰ与β2GP Ⅰ均有反应条带,具有较好的特异性.结论:成功获得并纯化β2GP Ⅰ单克隆抗体,为进一步研究β2GP Ⅰ/anti-β2GP Ⅰ复合物在抗磷脂综合征中的作用奠定了基础.
目的:製備β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)單剋隆抗體(MAbs),併鑒定抗體的特性.方法:以純化的人血漿β2GP Ⅰ免疫BALB/c小鼠,採用PEG融閤技術,間接ELISA法和有限稀釋法,製備和篩選雜交瘤細胞.雜交瘤細胞繼續擴大培養後註入BALB/c小鼠腹腔製備腹水,經硫痠銨沉澱及Protein G純化MAbs.鞦水仙素阻抑法鑒定雜交瘤細胞株染色體數目,ELISA測定滴度,Ig亞類試劑盒鑒定Ig亞類,Western blot鑒定特異性.結果:穫得1株穩定分泌MAbs的雜交瘤細胞株β2,該雜交瘤細胞株的染色體數為99 ～108.進一步研究髮現,其培養液和腹水滴度為1∶29和1∶215,其MAbs分類為IgG1/κ,Western blot 顯示純化的MAbs及標準anti-β2GP Ⅰ與β2GP Ⅰ均有反應條帶,具有較好的特異性.結論:成功穫得併純化β2GP Ⅰ單剋隆抗體,為進一步研究β2GP Ⅰ/anti-β2GP Ⅰ複閤物在抗燐脂綜閤徵中的作用奠定瞭基礎.
목적:제비β2당단백Ⅰ(β2GPⅠ)단극륭항체(MAbs),병감정항체적특성.방법:이순화적인혈장β2GP Ⅰ면역BALB/c소서,채용PEG융합기술,간접ELISA법화유한희석법,제비화사선잡교류세포.잡교류세포계속확대배양후주입BALB/c소서복강제비복수,경류산안침정급Protein G순화MAbs.추수선소조억법감정잡교류세포주염색체수목,ELISA측정적도,Ig아류시제합감정Ig아류,Western blot감정특이성.결과:획득1주은정분비MAbs적잡교류세포주β2,해잡교류세포주적염색체수위99 ～108.진일보연구발현,기배양액화복수적도위1∶29화1∶215,기MAbs분류위IgG1/κ,Western blot 현시순화적MAbs급표준anti-β2GP Ⅰ여β2GP Ⅰ균유반응조대,구유교호적특이성.결론:성공획득병순화β2GP Ⅰ단극륭항체,위진일보연구β2GP Ⅰ/anti-β2GP Ⅰ복합물재항린지종합정중적작용전정료기출.
