动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
57-61
,共5页
王彩凤%敖敦格日勒%小琴%特尼格尔%赵慧%格日勒图
王綵鳳%敖敦格日勒%小琴%特尼格爾%趙慧%格日勒圖
왕채봉%오돈격일륵%소금%특니격이%조혜%격일륵도
短小乳杆菌%重组S-层蛋白质%纯化%体外%黏附特性
短小乳桿菌%重組S-層蛋白質%純化%體外%黏附特性
단소유간균%중조S-층단백질%순화%체외%점부특성
以本实验室已构建的pMD19T-slp为模板,应用PCR方法亚克隆slp基因,将其定点插入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建原核表达载体pGEX-slp,经IPTG诱导获得重组融合蛋白GST-SLP并用LiC1的方法进行纯化.应用SDS-PAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定,应用ELISA方法鉴定重组融合蛋白的体外黏附特性.在大肠埃希菌裂解样品中,SDS-PAGE和Western blot结果均证明分子质量大小约为71 ku的重组融合蛋白GST-SLP的存在；ELISA结果提示,该重组融合蛋白在体外能够有效地黏附在乳酸乳球菌NZ9000表面.本试验为S-层蛋白质生物学特性的进一步研究奠定了基础.
以本實驗室已構建的pMD19T-slp為模闆,應用PCR方法亞剋隆slp基因,將其定點插入到原覈錶達載體pGEX-4T-3中,成功構建原覈錶達載體pGEX-slp,經IPTG誘導穫得重組融閤蛋白GST-SLP併用LiC1的方法進行純化.應用SDS-PAGE和Western blot方法對錶達產物進行鑒定,應用ELISA方法鑒定重組融閤蛋白的體外黏附特性.在大腸埃希菌裂解樣品中,SDS-PAGE和Western blot結果均證明分子質量大小約為71 ku的重組融閤蛋白GST-SLP的存在；ELISA結果提示,該重組融閤蛋白在體外能夠有效地黏附在乳痠乳毬菌NZ9000錶麵.本試驗為S-層蛋白質生物學特性的進一步研究奠定瞭基礎.
이본실험실이구건적pMD19T-slp위모판,응용PCR방법아극륭slp기인,장기정점삽입도원핵표체재체pGEX-4T-3중,성공구건원핵표체재체pGEX-slp,경IPTG유도획득중조융합단백GST-SLP병용LiC1적방법진행순화.응용SDS-PAGE화Western blot방법대표체산물진행감정,응용ELISA방법감정중조융합단백적체외점부특성.재대장애희균렬해양품중,SDS-PAGE화Western blot결과균증명분자질량대소약위71 ku적중조융합단백GST-SLP적존재；ELISA결과제시,해중조융합단백재체외능구유효지점부재유산유구균NZ9000표면.본시험위S-층단백질생물학특성적진일보연구전정료기출.
