兔视黄醇结合蛋白4基因的克隆及原核表达
토시황순결합단백4기인적극륭급원핵표체
Cloning and Prokaryotic Expression of Rabbit Retinol Binding Protein 4 Gene
  • 万方数据
    动物医学进展 동물의학진전
    PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
    2013年 7期 53-56 ,共4页

    王泽祥%孙宏勇%郭东春%单丽玲%原冬伟%刘家森%曲连东

    왕택상%손굉용%곽동춘%단려령%원동위%류가삼%곡련동

    兔视黄醇结合蛋白4%原核表达%肝细胞 兔視黃醇結閤蛋白4%原覈錶達%肝細胞
    토시황순결합단백4%원핵표체%간세포
    为表达兔视黄醇结合蛋白4 (rRBP4),提取兔肝脏组织总RNA,采用RT-PCR技术扩增了rRBP4的基因,大小为606 bp.将其克隆于原核表达载体pET-32a(+)获得表达重组质粒,并转化大肠埃希菌BL21 (DE3) Plyss中进行表达,pET-32a-rRBP4以包涵体形式表达,包涵体经过洗涤、变性后,用镍离子亲和层析柱纯化,并利用尿素梯度透析法复性.SDS-PAGE分析表明,获得与预期分子质量一致的特异性目的蛋白；Western blot检测表明,重组蛋白与小鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应.
    위표체토시황순결합단백4 (rRBP4),제취토간장조직총RNA,채용RT-PCR기술확증료rRBP4적기인,대소위606 bp.장기극륭우원핵표체재체pET-32a(+)획득표체중조질립,병전화대장애희균BL21 (DE3) Plyss중진행표체,pET-32a-rRBP4이포함체형식표체,포함체경과세조、변성후,용얼리자친화층석주순화,병이용뇨소제도투석법복성.SDS-PAGE분석표명,획득여예기분자질량일치적특이성목적단백；Western blot검측표명,중조단백여소서항His표첨단극륭항체발생특이성반응.
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