CAJ | 학술논문

[目的]建立1种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法.[方法]根据JEV E基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进行一步法扩增,并对反应条件和反应体系进行了优化.[结果]该方法具有较高的灵敏度,其检测极限为0.5 pg；特异性试验表明其具有较高的特异性,对其他病毒性病原体均无扩增反应.与RT-Nested-PCR相比,2种方法检出率的符合率为90.9％.反应结束后可以通过添加化学发光剂进行可视化观察,大大缩短了检测时间.该方法无需特殊仪器,只需在水浴锅中进行,是一种适于基层的简便、灵敏、快速的猪JE的检测方法.[结论]成功建立了猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法,并在临床上进行了初步应用.
[목적]건립1충쾌속、령민、특이적검측저류행성을형뇌염병독(JEV)역전록배개도등온확증(RT-LAMP)검측방법.[방법]근거JEV E기인서렬적보수구6개위점설계료4조특이성LAMP인물,이JEV양성양품RNA위모판진행일보법확증,병대반응조건화반응체계진행료우화.[결과]해방법구유교고적령민도,기검측겁한위0.5 pg；특이성시험표명기구유교고적특이성,대기타병독성병원체균무확증반응.여RT-Nested-PCR상비,2충방법검출솔적부합솔위90.9％.반응결속후가이통과첨가화학발광제진행가시화관찰,대대축단료검측시간.해방법무수특수의기,지수재수욕과중진행,시일충괄우기층적간편、령민、쾌속적저JE적검측방법.[결론]성공건립료저류행성을형뇌염RT-LAMP방법,병재림상상진행료초보응용.