结核分枝杆菌ESAT6基因真核表达载体的构建及表达
결핵분지간균ESAT6기인진핵표체재체적구건급표체
Construction of the Eukaryotic Expression Vector for ESAT6 Gene of Mycobacterium tuberculosis and Its Expression
  • 万方数据
    石河子大学学报（自然科学版） 석하자대학학보（자연과학판）
    JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
    2013年 3期 318-322 ,共5页

    李跃峰%付强%张俊波%史慧君%李志强%程婷婷%张辉%曹旭东%陈创夫

    리약봉%부강%장준파%사혜군%리지강%정정정%장휘%조욱동%진창부

    结核病%ESAT6%CFP10 結覈病%ESAT6%CFP10
    결핵병%ESAT6%CFP10
    tuberculosis%ESAT6%CFP10
    为了研究结核杆菌毒力因子ESAT6在结核杆菌感染细胞过程中的功能.采用分子生物学方法,根据Gen-Bank中登录的结核杆菌H37Rv的ESAT6基因序列设计1对引物,以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增得到ESAT6基因DNA片段.将扩增片段克隆于pGM18-T载体中,测序验证后,再将ESAT6基因亚克隆至pEGFP-N1中,经核苷酸序列测定和酶切鉴定获得重组表达质粒pEGFP-N1-ESAT6.用重组表达质粒pEGFP-N1-ESAT6转染293T细胞.结果显示:重组表达质粒pEGFP-N1-ESAT6测序结果正确,转染细胞后出现绿色荧光,经Western blot分析鉴定,可见约35 kDa的预期蛋白条带,证实ESAT6-EGFP融合蛋白在293T细胞中获得了表达.研究结果为进一步研究毒力因子ESAT6在感染宿主细胞中所发挥胞内生存机制奠定了基础.
    위료연구결핵간균독력인자ESAT6재결핵간균감염세포과정중적공능.채용분자생물학방법,근거Gen-Bank중등록적결핵간균H37Rv적ESAT6기인서렬설계1대인물,이결핵간균H37Rv기인조DNA위모판,PCR확증득도ESAT6기인DNA편단.장확증편단극륭우pGM18-T재체중,측서험증후,재장ESAT6기인아극륭지pEGFP-N1중,경핵감산서렬측정화매절감정획득중조표체질립pEGFP-N1-ESAT6.용중조표체질립pEGFP-N1-ESAT6전염293T세포.결과현시:중조표체질립pEGFP-N1-ESAT6측서결과정학,전염세포후출현록색형광,경Western blot분석감정,가견약35 kDa적예기단백조대,증실ESAT6-EGFP융합단백재293T세포중획득료표체.연구결과위진일보연구독력인자ESAT6재감염숙주세포중소발휘포내생존궤제전정료기출.
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