CAJ | 학술논문

建立了快速检测牛奶、奶粉、饲料样品中三聚氰胺的胶体金免疫层析分析法.将三聚氰胺进行分子修饰得到两种衍生物,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)相连制得免疫原和包被抗原.运用杂交瘤抗体制备技术得到抗三聚氰胺的单克隆抗体(mAb).利用柠檬酸三钠还原法制得平均粒径18 nm的胶体金,将胶体金与抗三聚氰胺单克隆抗体相连,所形成的金标抗体(Au-mAb)包被在胶体金垫上,包被抗原和羊抗鼠二抗分别包被在硝酸纤维素膜(NC)上作为检测线(T线)和质控线(C线).将胶金垫、NC膜、样品垫和吸水纸组装成免疫层析快速检测试剂条.将标准溶液(或待测液)滴加到样品垫上,10 min后可在NC膜C线和T线位置上用肉眼观察到胶体金的颜色(红色),通过比对颜色的深浅判断样品中三聚氰胺的含量.结果表明,三聚氰胺的检出限为10 μg/L;选用了其它10种物质对免疫层析试剂条进行了特异性实验,免疫层析试剂条与2-氯-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪和环丙氨嗪的交叉反应率约为1％,与其它8种物质没有交叉反应；加标样品用免疫层析试剂条和酶联免疫吸附分析法(ELISA)同时检查,结果一致.本方法适用于牛奶、奶粉、饲料样品中三聚氰胺的现场快速检测.
건립료쾌속검측우내、내분、사료양품중삼취청알적효체금면역층석분석법.장삼취청알진행분자수식득도량충연생물,분별여우혈청백단백(BSA)화란청백단백(OVA)상련제득면역원화포피항원.운용잡교류항체제비기술득도항삼취청알적단극륭항체(mAb).이용저몽산삼납환원법제득평균립경18 nm적효체금,장효체금여항삼취청알단극륭항체상련,소형성적금표항체(Au-mAb)포피재효체금점상,포피항원화양항서이항분별포피재초산섬유소막(NC)상작위검측선(T선)화질공선(C선).장효금점、NC막、양품점화흡수지조장성면역층석쾌속검측시제조.장표준용액(혹대측액)적가도양품점상,10 min후가재NC막C선화T선위치상용육안관찰도효체금적안색(홍색),통과비대안색적심천판단양품중삼취청알적함량.결과표명,삼취청알적검출한위10 μg/L;선용료기타10충물질대면역층석시제조진행료특이성실험,면역층석시제조여2-록-4,6-이안기-1,3,5-삼진화배병안진적교차반응솔약위1％,여기타8충물질몰유교차반응；가표양품용면역층석시제조화매련면역흡부분석법(ELISA)동시검사,결과일치.본방법괄용우우내、내분、사료양품중삼취청알적현장쾌속검측.