分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2013年
7期
1013-1018
,共6页
吴琼%王世聪%马俊锋%李婉南%邢述%付学奇
吳瓊%王世聰%馬俊鋒%李婉南%邢述%付學奇
오경%왕세총%마준봉%리완남%형술%부학기
超高效液相色谱串联质谱%还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸%3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶%抑制剂筛选
超高效液相色譜串聯質譜%還原型煙酰胺腺嘌呤二覈苷痠燐痠%3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶%抑製劑篩選
초고효액상색보천련질보%환원형연선알선표령이핵감산린산%3-간기-3-갑기무이선보매A환원매%억제제사선
Ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry%Reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate%3-Hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase%Inhibitor screening
建立了超高效液相色谱串联质谱仪(UPLC-MS/MS)检测酶促反应体系中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)浓度变化,快速筛选3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)抑制剂的方法.优化了HMGCR酶促反应体系和检测NADPH的色谱-质谱条件,探讨了NADPH的离子化试剂的作用和质谱碎裂机理.采用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),以三乙胺/六氟异丙醇缓冲液(pH=8.0)为流动相,流速0.3 mL/min,柱温30℃,电喷雾离子源-多反应监测模式,对酶促反应体系中的NADPH进行分析.NADPH的峰面积与其浓度在0.05 ～ 50 μmol/L范围内呈良好的线性关系(r＞0.9996),定量限(S/N=10)为0.05 μ mol/L.
建立瞭超高效液相色譜串聯質譜儀(UPLC-MS/MS)檢測酶促反應體繫中還原型煙酰胺腺嘌呤二覈苷痠燐痠(NADPH)濃度變化,快速篩選3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)抑製劑的方法.優化瞭HMGCR酶促反應體繫和檢測NADPH的色譜-質譜條件,探討瞭NADPH的離子化試劑的作用和質譜碎裂機理.採用ACQUITY UPLC BEH Amide色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),以三乙胺/六氟異丙醇緩遲液(pH=8.0)為流動相,流速0.3 mL/min,柱溫30℃,電噴霧離子源-多反應鑑測模式,對酶促反應體繫中的NADPH進行分析.NADPH的峰麵積與其濃度在0.05 ～ 50 μmol/L範圍內呈良好的線性關繫(r＞0.9996),定量限(S/N=10)為0.05 μ mol/L.
건립료초고효액상색보천련질보의(UPLC-MS/MS)검측매촉반응체계중환원형연선알선표령이핵감산린산(NADPH)농도변화,쾌속사선3-간기-3-갑기무이선보매A환원매(HMGCR)억제제적방법.우화료HMGCR매촉반응체계화검측NADPH적색보-질보조건,탐토료NADPH적리자화시제적작용화질보쇄렬궤리.채용ACQUITY UPLC BEH Amide색보주(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),이삼을알/륙불이병순완충액(pH=8.0)위류동상,류속0.3 mL/min,주온30℃,전분무리자원-다반응감측모식,대매촉반응체계중적NADPH진행분석.NADPH적봉면적여기농도재0.05 ～ 50 μmol/L범위내정량호적선성관계(r＞0.9996),정량한(S/N=10)위0.05 μ mol/L.
