泸州医学院学报
瀘州醫學院學報
로주의학원학보
JOURNAL OF LUZHOU MEDICAL COLLEGE
2013年
1期
39-42
,共4页
C-erbB-2%肺腺癌%克隆%T载体
C-erbB-2%肺腺癌%剋隆%T載體
C-erbB-2%폐선암%극륭%T재체
目的:选择C-erbB-2(neu)基因中编码两个HLA-A2限制性CTL抗原肽表位p106-114,p369-377的基因片段,构建克隆载体pGM-neu1(包含p106-114片段)和pGM-neu2(包含p369-377片段).方法:用免疫组化方法检测小鼠Lewis肺腺癌细胞中C-erbB-2的表达,然后采用RT-PCR技术,从小鼠Lewis肺腺癌细胞总RNA中扩增编码neu1(包含p106-114片段)、neu2(包含p369-377片段)的基因片段,通过连接反应构建重组克隆载体,测序鉴定.结果:免疫组化染色检测C-erbB-2的表达,发现小鼠Lewis肺腺癌细胞有明显深棕色,表现出较强阳性,阳性信号位于细胞膜.RT-PCR扩增产物neu1、neu2基因片段大小与理论预期相符.重组克隆载体经DNA序列测定,结果与GeneBank中小鼠C-erbB-2的基因序列一致.结论:C-erbB-2在小鼠Lewis肺腺癌细胞中有较高表达,成功构建了克隆载体pGM-neu1和pGM-neu2.
目的:選擇C-erbB-2(neu)基因中編碼兩箇HLA-A2限製性CTL抗原肽錶位p106-114,p369-377的基因片段,構建剋隆載體pGM-neu1(包含p106-114片段)和pGM-neu2(包含p369-377片段).方法:用免疫組化方法檢測小鼠Lewis肺腺癌細胞中C-erbB-2的錶達,然後採用RT-PCR技術,從小鼠Lewis肺腺癌細胞總RNA中擴增編碼neu1(包含p106-114片段)、neu2(包含p369-377片段)的基因片段,通過連接反應構建重組剋隆載體,測序鑒定.結果:免疫組化染色檢測C-erbB-2的錶達,髮現小鼠Lewis肺腺癌細胞有明顯深棕色,錶現齣較彊暘性,暘性信號位于細胞膜.RT-PCR擴增產物neu1、neu2基因片段大小與理論預期相符.重組剋隆載體經DNA序列測定,結果與GeneBank中小鼠C-erbB-2的基因序列一緻.結論:C-erbB-2在小鼠Lewis肺腺癌細胞中有較高錶達,成功構建瞭剋隆載體pGM-neu1和pGM-neu2.
목적:선택C-erbB-2(neu)기인중편마량개HLA-A2한제성CTL항원태표위p106-114,p369-377적기인편단,구건극륭재체pGM-neu1(포함p106-114편단)화pGM-neu2(포함p369-377편단).방법:용면역조화방법검측소서Lewis폐선암세포중C-erbB-2적표체,연후채용RT-PCR기술,종소서Lewis폐선암세포총RNA중확증편마neu1(포함p106-114편단)、neu2(포함p369-377편단)적기인편단,통과련접반응구건중조극륭재체,측서감정.결과:면역조화염색검측C-erbB-2적표체,발현소서Lewis폐선암세포유명현심종색,표현출교강양성,양성신호위우세포막.RT-PCR확증산물neu1、neu2기인편단대소여이론예기상부.중조극륭재체경DNA서렬측정,결과여GeneBank중소서C-erbB-2적기인서렬일치.결론:C-erbB-2재소서Lewis폐선암세포중유교고표체,성공구건료극륭재체pGM-neu1화pGM-neu2.
