中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2013年
13期
212-215
,共4页
李玄%贺晓丽%童元峰%吴松%毕明刚
李玄%賀曉麗%童元峰%吳鬆%畢明剛
리현%하효려%동원봉%오송%필명강
HepG2%肿瘤%内质网应激%钙稳态%未折叠蛋白反应
HepG2%腫瘤%內質網應激%鈣穩態%未摺疊蛋白反應
HepG2%종류%내질망응격%개은태%미절첩단백반응
HepG2%tumor%endoplasmic reticulum stress%intracellular free Ca2+ concentration%unfolded protein response
目的:研究新型抗肿瘤药物6'-羟基爵床素A(6'-hydroxy justicidin A,JR6)对HepG2细胞的内质网应激及胞内钙离子浓度变化的影响及其意义.方法:HepG2细胞经过终浓度分别为0,0.615,2.45,9.8 μmol· L-的JR6处理24h后采用实时定量RT-PCR技术、蛋白印迹(Western blot)法检测细胞中X-盒结合蛋白1(XBP-1) mRNA,IRE1 α(inositol-requiring enzyme-1α),GRP78/BiP(glucose regulated protein/BiP),及Bcl-2(B cell leukemia 2)蛋白表达量的变化.激光扫描共聚焦显微镜测JR6作用24h后细胞内静息钙浓度变化及IP3R钙泵抑制剂光溜海绵素C干预后JR6的作用变化.结果:IRE1,XBP-1 mRNA,Bip,Bcl-2蛋白的表达量均与JR6剂量负相关.高剂量组的各蛋白表达量与空白组相比,均下降了40%左右.共聚焦显微镜观察结果显示JR6引起细胞内钙离子浓度升高了2倍左右;加入IP3R钙泵抑制剂后,JR6不能引起细胞内钙升高.结论:JR6通过内质网钙泵IP3R升高细胞内的钙浓度,破坏细胞内的钙稳态;同时引起了内质网应激,并抑制了未折叠蛋白反应的相关因子.
目的:研究新型抗腫瘤藥物6'-羥基爵床素A(6'-hydroxy justicidin A,JR6)對HepG2細胞的內質網應激及胞內鈣離子濃度變化的影響及其意義.方法:HepG2細胞經過終濃度分彆為0,0.615,2.45,9.8 μmol· L-的JR6處理24h後採用實時定量RT-PCR技術、蛋白印跡(Western blot)法檢測細胞中X-盒結閤蛋白1(XBP-1) mRNA,IRE1 α(inositol-requiring enzyme-1α),GRP78/BiP(glucose regulated protein/BiP),及Bcl-2(B cell leukemia 2)蛋白錶達量的變化.激光掃描共聚焦顯微鏡測JR6作用24h後細胞內靜息鈣濃度變化及IP3R鈣泵抑製劑光霤海綿素C榦預後JR6的作用變化.結果:IRE1,XBP-1 mRNA,Bip,Bcl-2蛋白的錶達量均與JR6劑量負相關.高劑量組的各蛋白錶達量與空白組相比,均下降瞭40%左右.共聚焦顯微鏡觀察結果顯示JR6引起細胞內鈣離子濃度升高瞭2倍左右;加入IP3R鈣泵抑製劑後,JR6不能引起細胞內鈣升高.結論:JR6通過內質網鈣泵IP3R升高細胞內的鈣濃度,破壞細胞內的鈣穩態;同時引起瞭內質網應激,併抑製瞭未摺疊蛋白反應的相關因子.
목적:연구신형항종류약물6'-간기작상소A(6'-hydroxy justicidin A,JR6)대HepG2세포적내질망응격급포내개리자농도변화적영향급기의의.방법:HepG2세포경과종농도분별위0,0.615,2.45,9.8 μmol· L-적JR6처리24h후채용실시정량RT-PCR기술、단백인적(Western blot)법검측세포중X-합결합단백1(XBP-1) mRNA,IRE1 α(inositol-requiring enzyme-1α),GRP78/BiP(glucose regulated protein/BiP),급Bcl-2(B cell leukemia 2)단백표체량적변화.격광소묘공취초현미경측JR6작용24h후세포내정식개농도변화급IP3R개빙억제제광류해면소C간예후JR6적작용변화.결과:IRE1,XBP-1 mRNA,Bip,Bcl-2단백적표체량균여JR6제량부상관.고제량조적각단백표체량여공백조상비,균하강료40%좌우.공취초현미경관찰결과현시JR6인기세포내개리자농도승고료2배좌우;가입IP3R개빙억제제후,JR6불능인기세포내개승고.결론:JR6통과내질망개빙IP3R승고세포내적개농도,파배세포내적개은태;동시인기료내질망응격,병억제료미절첩단백반응적상관인자.