南京中医药大学学报
南京中醫藥大學學報
남경중의약대학학보
JOURNAL OF NANJING UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2013年
5期
455-458
,共4页
胡新%陈卫平%颜晓静%姜泽群
鬍新%陳衛平%顏曉靜%薑澤群
호신%진위평%안효정%강택군
凉血化瘀方%肝细胞%凋亡%自噬
涼血化瘀方%肝細胞%凋亡%自噬
량혈화어방%간세포%조망%자서
Liangxue Huayu Fang%hepatocyte%apoptosis%autophagy
目的 研究凉血化瘀方对肿瘤坏死因子α(TNF-α)联合D-氨基半乳糖(D-GalN)所致肝细胞损伤中自噬和凋亡相关途径的影响,并探讨其分子调控机制.方法 体外培养人正常肝LO2细胞,用TNF-α(100 ng/mL)和D-GalN(44 μg/mL)诱导肝细胞损伤模型,荧光显微镜观察细胞的形态学变化;MTT法检测细胞活力;Western blot检测凋亡和自噬标志蛋白caspase-3、Beclin1、LC3 Ⅰ 、LC3Ⅱ,凋亡和自噬调节蛋白Bax、Bcl-2和mTOR信号通路调控途径mTOR蛋白表达水平的变化.结果 凉血化瘀方能改善肝细胞病理损伤,并表现有剂量依赖性;治疗组细胞凋亡和自噬标志蛋白caspase-3、Beclin1、LC3Ⅱ表达下调,凋亡和自噬调控蛋白中负相关的Bcl-2表达上调、正相关的Bax表达下调,并呈现一定的量效关系,同时mTOR蛋白的表达也体现了剂量相关的下调作用.结论 凉血化瘀方对TNF-α+D-GalN所致肝细胞损伤的保护作用,与抑制细胞自噬和凋亡相关,其机制主要是参与自噬和凋亡相关途径中蛋白的表达调控.
目的 研究涼血化瘀方對腫瘤壞死因子α(TNF-α)聯閤D-氨基半乳糖(D-GalN)所緻肝細胞損傷中自噬和凋亡相關途徑的影響,併探討其分子調控機製.方法 體外培養人正常肝LO2細胞,用TNF-α(100 ng/mL)和D-GalN(44 μg/mL)誘導肝細胞損傷模型,熒光顯微鏡觀察細胞的形態學變化;MTT法檢測細胞活力;Western blot檢測凋亡和自噬標誌蛋白caspase-3、Beclin1、LC3 Ⅰ 、LC3Ⅱ,凋亡和自噬調節蛋白Bax、Bcl-2和mTOR信號通路調控途徑mTOR蛋白錶達水平的變化.結果 涼血化瘀方能改善肝細胞病理損傷,併錶現有劑量依賴性;治療組細胞凋亡和自噬標誌蛋白caspase-3、Beclin1、LC3Ⅱ錶達下調,凋亡和自噬調控蛋白中負相關的Bcl-2錶達上調、正相關的Bax錶達下調,併呈現一定的量效關繫,同時mTOR蛋白的錶達也體現瞭劑量相關的下調作用.結論 涼血化瘀方對TNF-α+D-GalN所緻肝細胞損傷的保護作用,與抑製細胞自噬和凋亡相關,其機製主要是參與自噬和凋亡相關途徑中蛋白的錶達調控.
목적 연구량혈화어방대종류배사인자α(TNF-α)연합D-안기반유당(D-GalN)소치간세포손상중자서화조망상관도경적영향,병탐토기분자조공궤제.방법 체외배양인정상간LO2세포,용TNF-α(100 ng/mL)화D-GalN(44 μg/mL)유도간세포손상모형,형광현미경관찰세포적형태학변화;MTT법검측세포활력;Western blot검측조망화자서표지단백caspase-3、Beclin1、LC3 Ⅰ 、LC3Ⅱ,조망화자서조절단백Bax、Bcl-2화mTOR신호통로조공도경mTOR단백표체수평적변화.결과 량혈화어방능개선간세포병리손상,병표현유제량의뢰성;치료조세포조망화자서표지단백caspase-3、Beclin1、LC3Ⅱ표체하조,조망화자서조공단백중부상관적Bcl-2표체상조、정상관적Bax표체하조,병정현일정적량효관계,동시mTOR단백적표체야체현료제량상관적하조작용.결론 량혈화어방대TNF-α+D-GalN소치간세포손상적보호작용,여억제세포자서화조망상관,기궤제주요시삼여자서화조망상관도경중단백적표체조공.
