中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
10期
1809-1814
,共6页
任琳%李轶%王山梅%师娟%郭思
任琳%李軼%王山梅%師娟%郭思
임림%리질%왕산매%사연%곽사
结核分枝杆菌%培养滤液蛋白10%早期分泌性抗原靶6%巨噬细胞%细胞增殖%细胞凋亡
結覈分枝桿菌%培養濾液蛋白10%早期分泌性抗原靶6%巨噬細胞%細胞增殖%細胞凋亡
결핵분지간균%배양려액단백10%조기분비성항원파6%거서세포%세포증식%세포조망
Mycobacterium tuberculosis%Culture filtrate protein 10%Early secretory antigenic target 6%Macrophages%Cell proliferation%Apoptosis
目的:建立培养滤液蛋白10-早期分泌性抗原靶6(CFP10-ESAT6)真核表达质粒并转染RAW264.7巨噬细胞,观察胞内表达CFP10-ESAT6对细胞活性及凋亡的影响,并初步探讨其机制.方法:将CFP10-ESAT6融合基因插入真核表达质粒pEGFP-N1,构建重组质粒,转染RAW264.7巨噬细胞.采用MTT的方法测定CFP10-ESAT6融合蛋白对RAW264.7巨噬细胞活性的影响,采用结核分枝杆菌19 kD脂蛋白和十字孢碱(staurosporine)处理RAW264.7巨噬细胞,并以流式细胞术检测细胞凋亡率以及Toll样受体2(TLR2)的表达.结果:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/CFP10-ESAT6并转染至RAW264.7巨噬细胞；与对照组相比,胞内表达CFP10-ESAT6不能影响巨噬细胞的活性,但可以明显抑制结核分枝杆菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡(P＜0.05),并显著抑制了TLR2的表达(P＜0.05).结论:巨噬细胞内表达的CFP10-ESAT6融合蛋白不具有细胞毒性作用,但可以通过下调TLR2的表达来抑制结核分枝杆菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡.
目的:建立培養濾液蛋白10-早期分泌性抗原靶6(CFP10-ESAT6)真覈錶達質粒併轉染RAW264.7巨噬細胞,觀察胞內錶達CFP10-ESAT6對細胞活性及凋亡的影響,併初步探討其機製.方法:將CFP10-ESAT6融閤基因插入真覈錶達質粒pEGFP-N1,構建重組質粒,轉染RAW264.7巨噬細胞.採用MTT的方法測定CFP10-ESAT6融閤蛋白對RAW264.7巨噬細胞活性的影響,採用結覈分枝桿菌19 kD脂蛋白和十字孢堿(staurosporine)處理RAW264.7巨噬細胞,併以流式細胞術檢測細胞凋亡率以及Toll樣受體2(TLR2)的錶達.結果:成功構建瞭重組質粒pEGFP-N1/CFP10-ESAT6併轉染至RAW264.7巨噬細胞；與對照組相比,胞內錶達CFP10-ESAT6不能影響巨噬細胞的活性,但可以明顯抑製結覈分枝桿菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡(P＜0.05),併顯著抑製瞭TLR2的錶達(P＜0.05).結論:巨噬細胞內錶達的CFP10-ESAT6融閤蛋白不具有細胞毒性作用,但可以通過下調TLR2的錶達來抑製結覈分枝桿菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡.
목적:건립배양려액단백10-조기분비성항원파6(CFP10-ESAT6)진핵표체질립병전염RAW264.7거서세포,관찰포내표체CFP10-ESAT6대세포활성급조망적영향,병초보탐토기궤제.방법:장CFP10-ESAT6융합기인삽입진핵표체질립pEGFP-N1,구건중조질립,전염RAW264.7거서세포.채용MTT적방법측정CFP10-ESAT6융합단백대RAW264.7거서세포활성적영향,채용결핵분지간균19 kD지단백화십자포감(staurosporine)처리RAW264.7거서세포,병이류식세포술검측세포조망솔이급Toll양수체2(TLR2)적표체.결과:성공구건료중조질립pEGFP-N1/CFP10-ESAT6병전염지RAW264.7거서세포；여대조조상비,포내표체CFP10-ESAT6불능영향거서세포적활성,단가이명현억제결핵분지간균19 kD지단백소조성적조망(P＜0.05),병현저억제료TLR2적표체(P＜0.05).결론:거서세포내표체적CFP10-ESAT6융합단백불구유세포독성작용,단가이통과하조TLR2적표체래억제결핵분지간균19 kD지단백소조성적조망.
