中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
10期
1777-1782
,共6页
陈攀科%石蓓%龙仙萍%刘志江%王正龙%王冬梅
陳攀科%石蓓%龍仙萍%劉誌江%王正龍%王鼕梅
진반과%석배%룡선평%류지강%왕정룡%왕동매
降钙素基因相关肽%间充质干细胞%血管平滑肌细胞%细胞增殖
降鈣素基因相關肽%間充質榦細胞%血管平滑肌細胞%細胞增殖
강개소기인상관태%간충질간세포%혈관평활기세포%세포증식
Calcitonin gene-related peptide%Mesenchymal stem cells%Vascular smooth muscle cells%Cell proliferation
目的:探讨降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)修饰的大鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和表型转化的影响及其机制.方法:分离、培养及鉴定大鼠MSCs和VSMCs.CGRP重组慢病毒(Lv-CGRP-EGFP)转染MSCs后,real-time PCR和ELISA法检测MSCs中CGRP的表达.MSCs-CGRP与VSMCs共培养后MTT、台盼蓝染色及划痕实验评价VSMCs增殖、迁移能力及细胞存活率.Western blotting法检测VSMCs中α-平滑肌肌动蛋白(alphasmooth muscle actin,α-SMA)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达水平.结果:与MSCs组和空载病毒转染组(MSCs-EGFP)比较,CGRP修饰的MSCs(MSCs-CGRP组)中CGRP的mRNA和蛋白表达水平增高(均P＜0.01).MTT法和划痕实验显示,与MSCs组和MSCs-EGFP组比较,MSCs-CGRP组中VSMCs的增殖和迁移能力明显减弱(P＜0.05),而且台盼蓝染色显示,各组细胞存活率均大于90％.Western blotting结果显示,与MSCs-CGRP共培养的VSMCs中α-SMA较MSCs组和MSCs-EGFP组表达增加,OPN的表达减少(均P＜0.05).结论:CGRP修饰的MSCs能分泌CGRP蛋白,并且能抑制VSMCs的增殖和迁移,其机制可能通过抑制VSMCs的表型从收缩表型向合成表型转化有关.
目的:探討降鈣素基因相關肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)脩飾的大鼠間充質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在體外對大鼠血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和錶型轉化的影響及其機製.方法:分離、培養及鑒定大鼠MSCs和VSMCs.CGRP重組慢病毒(Lv-CGRP-EGFP)轉染MSCs後,real-time PCR和ELISA法檢測MSCs中CGRP的錶達.MSCs-CGRP與VSMCs共培養後MTT、檯盼藍染色及劃痕實驗評價VSMCs增殖、遷移能力及細胞存活率.Western blotting法檢測VSMCs中α-平滑肌肌動蛋白(alphasmooth muscle actin,α-SMA)和骨橋蛋白(osteopontin,OPN)的錶達水平.結果:與MSCs組和空載病毒轉染組(MSCs-EGFP)比較,CGRP脩飾的MSCs(MSCs-CGRP組)中CGRP的mRNA和蛋白錶達水平增高(均P＜0.01).MTT法和劃痕實驗顯示,與MSCs組和MSCs-EGFP組比較,MSCs-CGRP組中VSMCs的增殖和遷移能力明顯減弱(P＜0.05),而且檯盼藍染色顯示,各組細胞存活率均大于90％.Western blotting結果顯示,與MSCs-CGRP共培養的VSMCs中α-SMA較MSCs組和MSCs-EGFP組錶達增加,OPN的錶達減少(均P＜0.05).結論:CGRP脩飾的MSCs能分泌CGRP蛋白,併且能抑製VSMCs的增殖和遷移,其機製可能通過抑製VSMCs的錶型從收縮錶型嚮閤成錶型轉化有關.
목적:탐토강개소기인상관태(calcitonin gene-related peptide,CGRP)수식적대서간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)재체외대대서혈관평활기세포(vascular smooth muscle cells,VSMCs)증식화표형전화적영향급기궤제.방법:분리、배양급감정대서MSCs화VSMCs.CGRP중조만병독(Lv-CGRP-EGFP)전염MSCs후,real-time PCR화ELISA법검측MSCs중CGRP적표체.MSCs-CGRP여VSMCs공배양후MTT、태반람염색급화흔실험평개VSMCs증식、천이능력급세포존활솔.Western blotting법검측VSMCs중α-평활기기동단백(alphasmooth muscle actin,α-SMA)화골교단백(osteopontin,OPN)적표체수평.결과:여MSCs조화공재병독전염조(MSCs-EGFP)비교,CGRP수식적MSCs(MSCs-CGRP조)중CGRP적mRNA화단백표체수평증고(균P＜0.01).MTT법화화흔실험현시,여MSCs조화MSCs-EGFP조비교,MSCs-CGRP조중VSMCs적증식화천이능력명현감약(P＜0.05),이차태반람염색현시,각조세포존활솔균대우90％.Western blotting결과현시,여MSCs-CGRP공배양적VSMCs중α-SMA교MSCs조화MSCs-EGFP조표체증가,OPN적표체감소(균P＜0.05).결론:CGRP수식적MSCs능분비CGRP단백,병차능억제VSMCs적증식화천이,기궤제가능통과억제VSMCs적표형종수축표형향합성표형전화유관.
