贵州农业科学
貴州農業科學
귀주농업과학
GUIZHOU AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
10期
30-34
,共5页
银胶菊%SRAP-PCR%体系优化%引物筛选
銀膠菊%SRAP-PCR%體繫優化%引物篩選
은효국%SRAP-PCR%체계우화%인물사선
Parthenium hysterophorus%SRAP-PCR%optimization of reaction system%primers screening
为了使入侵性植物银胶菊的后续试验更顺利高效,以银胶菊(Parthenium hysterophorus L.)为材料,采用L16 (4)正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中对扩增反应影响较大的3个因素(模板DNA浓度、dNTPs浓度、引物浓度)及退火温度进行优化.结果表明:银胶菊最优SRAP-PCR反应体系25μL中含有DNA模版60 ng,上下游引物各0.4μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,2.5 μL 10×buffer(Mg2+ plus 2.5μmol/L),Taq DNA聚合酶2.5U,退火温度为50℃.其中,dNTPs的用量对扩增反应影响较大,而引物用量及模板用量影响则较小.利用该体系从48对引物组合中筛选出条带丰富清晰的引物17对.
為瞭使入侵性植物銀膠菊的後續試驗更順利高效,以銀膠菊(Parthenium hysterophorus L.)為材料,採用L16 (4)正交試驗設計,對SRAP-PCR反應體繫中對擴增反應影響較大的3箇因素(模闆DNA濃度、dNTPs濃度、引物濃度)及退火溫度進行優化.結果錶明:銀膠菊最優SRAP-PCR反應體繫25μL中含有DNA模版60 ng,上下遊引物各0.4μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,2.5 μL 10×buffer(Mg2+ plus 2.5μmol/L),Taq DNA聚閤酶2.5U,退火溫度為50℃.其中,dNTPs的用量對擴增反應影響較大,而引物用量及模闆用量影響則較小.利用該體繫從48對引物組閤中篩選齣條帶豐富清晰的引物17對.
위료사입침성식물은효국적후속시험경순리고효,이은효국(Parthenium hysterophorus L.)위재료,채용L16 (4)정교시험설계,대SRAP-PCR반응체계중대확증반응영향교대적3개인소(모판DNA농도、dNTPs농도、인물농도)급퇴화온도진행우화.결과표명:은효국최우SRAP-PCR반응체계25μL중함유DNA모판60 ng,상하유인물각0.4μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,2.5 μL 10×buffer(Mg2+ plus 2.5μmol/L),Taq DNA취합매2.5U,퇴화온도위50℃.기중,dNTPs적용량대확증반응영향교대,이인물용량급모판용량영향칙교소.이용해체계종48대인물조합중사선출조대봉부청석적인물17대.
