中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
4期
698-703
,共6页
龙放%丁文军%邓晓蓓%陈德亮%张芳
龍放%丁文軍%鄧曉蓓%陳德亮%張芳
룡방%정문군%산효배%진덕량%장방
PM2.5%肺上皮细胞%氧化应激%细胞自噬
PM2.5%肺上皮細胞%氧化應激%細胞自噬
PM2.5%폐상피세포%양화응격%세포자서
PM2.5%lung epithelial cells%reactive oxygen species%autophagy
目的 研究大气细颗粒物PM2.5对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12细胞的氧化应激和自噬的影响.方法 用采集和处理的2009年北京市细颗粒物PM2.5 25,50,100和200 mg· L-1暴露处理MLE-12细胞24和48 h,用MTT比色法测定细胞存活率,双乙酰基二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧类(ROS)自由基生成,Western蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3Ⅰ蛋白(LC3 Ⅰ)和LC3Ⅱ表达,激光共聚焦显微镜观察细胞自噬体的形成.结果 与细胞对照组比较,PM2.5100和200 mg· L-1处理24 h组细胞存活率明显降低,分别降低28％和33％(P＜0.01);暴露处理48 h,PM2.5 25 ～200 mg·L-1组细胞存活率均明显下降(P＜0.01),并呈浓度效应关系(R2=0.4940,P＜0.01).PM2.5 100和200 mg·L-1处理MLE-12细胞3h,胞内ROS水平较细胞对照组显著升高,分别升高27.6％和60.7％(P＜0.01).此外,PM2.5100 mg·L-1处理细胞12,24和48 h及PM25 50,100和200 mg·L-1处理细胞24 h细胞自噬标志物LC3 Ⅱ蛋白表达均明显增强,呈现明显的时间效应(R2=0.9150,P＜0.01)和浓度效应(R2=0.6338,P＜0.01)关系.PM2,5100 mg·L-1处理24 h细胞内自噬体荧光强度明显升高(P＜0.05),细胞核周边有明显的自噬泡环绕.结论 PM2.5诱导肺泡Ⅱ型上皮MLE-12细胞的氧化应激,并引发细胞自噬.
目的 研究大氣細顆粒物PM2.5對小鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞MLE-12細胞的氧化應激和自噬的影響.方法 用採集和處理的2009年北京市細顆粒物PM2.5 25,50,100和200 mg· L-1暴露處理MLE-12細胞24和48 h,用MTT比色法測定細胞存活率,雙乙酰基二氯熒光素(DCFH-DA)熒光探針檢測細胞內活性氧類(ROS)自由基生成,Western蛋白質印跡法檢測微管相關蛋白1輕鏈3Ⅰ蛋白(LC3 Ⅰ)和LC3Ⅱ錶達,激光共聚焦顯微鏡觀察細胞自噬體的形成.結果 與細胞對照組比較,PM2.5100和200 mg· L-1處理24 h組細胞存活率明顯降低,分彆降低28％和33％(P＜0.01);暴露處理48 h,PM2.5 25 ～200 mg·L-1組細胞存活率均明顯下降(P＜0.01),併呈濃度效應關繫(R2=0.4940,P＜0.01).PM2.5 100和200 mg·L-1處理MLE-12細胞3h,胞內ROS水平較細胞對照組顯著升高,分彆升高27.6％和60.7％(P＜0.01).此外,PM2.5100 mg·L-1處理細胞12,24和48 h及PM25 50,100和200 mg·L-1處理細胞24 h細胞自噬標誌物LC3 Ⅱ蛋白錶達均明顯增彊,呈現明顯的時間效應(R2=0.9150,P＜0.01)和濃度效應(R2=0.6338,P＜0.01)關繫.PM2,5100 mg·L-1處理24 h細胞內自噬體熒光彊度明顯升高(P＜0.05),細胞覈週邊有明顯的自噬泡環繞.結論 PM2.5誘導肺泡Ⅱ型上皮MLE-12細胞的氧化應激,併引髮細胞自噬.
목적 연구대기세과립물PM2.5대소서폐포Ⅱ형상피세포MLE-12세포적양화응격화자서적영향.방법 용채집화처리적2009년북경시세과립물PM2.5 25,50,100화200 mg· L-1폭로처리MLE-12세포24화48 h,용MTT비색법측정세포존활솔,쌍을선기이록형광소(DCFH-DA)형광탐침검측세포내활성양류(ROS)자유기생성,Western단백질인적법검측미관상관단백1경련3Ⅰ단백(LC3 Ⅰ)화LC3Ⅱ표체,격광공취초현미경관찰세포자서체적형성.결과 여세포대조조비교,PM2.5100화200 mg· L-1처리24 h조세포존활솔명현강저,분별강저28％화33％(P＜0.01);폭로처리48 h,PM2.5 25 ～200 mg·L-1조세포존활솔균명현하강(P＜0.01),병정농도효응관계(R2=0.4940,P＜0.01).PM2.5 100화200 mg·L-1처리MLE-12세포3h,포내ROS수평교세포대조조현저승고,분별승고27.6％화60.7％(P＜0.01).차외,PM2.5100 mg·L-1처리세포12,24화48 h급PM25 50,100화200 mg·L-1처리세포24 h세포자서표지물LC3 Ⅱ단백표체균명현증강,정현명현적시간효응(R2=0.9150,P＜0.01)화농도효응(R2=0.6338,P＜0.01)관계.PM2,5100 mg·L-1처리24 h세포내자서체형광강도명현승고(P＜0.05),세포핵주변유명현적자서포배요.결론 PM2.5유도폐포Ⅱ형상피MLE-12세포적양화응격,병인발세포자서.
