中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
4期
635-640
,共6页
卢英%金英%隋海娟%刘卓%屈文慧%郁盛雪%金迎新%李洪秀
盧英%金英%隋海娟%劉卓%屈文慧%鬱盛雪%金迎新%李洪秀
로영%금영%수해연%류탁%굴문혜%욱성설%금영신%리홍수
知母皂苷元%海马神经元%突触囊泡蛋白%蛋白激酶B%糖原合成酶3β
知母皂苷元%海馬神經元%突觸囊泡蛋白%蛋白激酶B%糖原閤成酶3β
지모조감원%해마신경원%돌촉낭포단백%단백격매B%당원합성매3β
sarsasapogenin%hippocampal neurons%synaptophysin%protein kinase B%glycogen synthase kinase 3
目的 探讨知母皂苷元(Sar)减轻淀粉样β蛋白(Aβ)诱导的海马神经元突触损伤的信号转导机制.方法 取出生0 ～24 h SD乳大鼠海马神经元,体外培养7d.海马神经元分别加入磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性阻断剂LY294002 30 μmol· L-1或蛋白激酶B(Akt)特异性阻断剂曲西立滨1 μmol· L-11h后,加Sar 30和100 μmol· L-1作用1h,再加Aβ1-42 50 nmol· L-1作用24 h.应用突触囊泡蛋白(SYP)免疫荧光染色观察突触的改变.Western蛋白质印迹法检测海马神经元SYP、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化糖原合成酶3β(p-GSK3β)表达水平的改变.结果 与正常对照组相比,Aβ1-42组培养的海马神经元SYP,p-Akt和p-GSK3β表达水平明显减低(P＜0.01).与Aβ1-42组相比,Aβ1-42+Sar 30和100 μmol·L-1组海马神经元SYP,p-Akt和p-GSK3β表达水平明显增加(P＜0.01).给予LY294002作用后,SYP和p-Akt表达水平明显降低(P＜0.05).给予曲西立滨作用后,SYP和p-GSK3β表达水平明显降低(P＜0.05).单独给予LY294002,海马神经元SYP表达无变化,p-Akt表达水平明显降低(P＜0.01).单独给予曲西立滨,海马神经元SYP和p-GSK3β蛋白表达水平明显降低(P＜0.01).结论 Sar通过上调PI3K/Akt/GSK3β信号通路对抗Aβ1-42诱导的海马神经元突触损伤.
目的 探討知母皂苷元(Sar)減輕澱粉樣β蛋白(Aβ)誘導的海馬神經元突觸損傷的信號轉導機製.方法 取齣生0 ～24 h SD乳大鼠海馬神經元,體外培養7d.海馬神經元分彆加入燐脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特異性阻斷劑LY294002 30 μmol· L-1或蛋白激酶B(Akt)特異性阻斷劑麯西立濱1 μmol· L-11h後,加Sar 30和100 μmol· L-1作用1h,再加Aβ1-42 50 nmol· L-1作用24 h.應用突觸囊泡蛋白(SYP)免疫熒光染色觀察突觸的改變.Western蛋白質印跡法檢測海馬神經元SYP、燐痠化Akt(p-Akt)和燐痠化糖原閤成酶3β(p-GSK3β)錶達水平的改變.結果 與正常對照組相比,Aβ1-42組培養的海馬神經元SYP,p-Akt和p-GSK3β錶達水平明顯減低(P＜0.01).與Aβ1-42組相比,Aβ1-42+Sar 30和100 μmol·L-1組海馬神經元SYP,p-Akt和p-GSK3β錶達水平明顯增加(P＜0.01).給予LY294002作用後,SYP和p-Akt錶達水平明顯降低(P＜0.05).給予麯西立濱作用後,SYP和p-GSK3β錶達水平明顯降低(P＜0.05).單獨給予LY294002,海馬神經元SYP錶達無變化,p-Akt錶達水平明顯降低(P＜0.01).單獨給予麯西立濱,海馬神經元SYP和p-GSK3β蛋白錶達水平明顯降低(P＜0.01).結論 Sar通過上調PI3K/Akt/GSK3β信號通路對抗Aβ1-42誘導的海馬神經元突觸損傷.
목적 탐토지모조감원(Sar)감경정분양β단백(Aβ)유도적해마신경원돌촉손상적신호전도궤제.방법 취출생0 ～24 h SD유대서해마신경원,체외배양7d.해마신경원분별가입린지선기순-3-격매(PI3K)특이성조단제LY294002 30 μmol· L-1혹단백격매B(Akt)특이성조단제곡서립빈1 μmol· L-11h후,가Sar 30화100 μmol· L-1작용1h,재가Aβ1-42 50 nmol· L-1작용24 h.응용돌촉낭포단백(SYP)면역형광염색관찰돌촉적개변.Western단백질인적법검측해마신경원SYP、린산화Akt(p-Akt)화린산화당원합성매3β(p-GSK3β)표체수평적개변.결과 여정상대조조상비,Aβ1-42조배양적해마신경원SYP,p-Akt화p-GSK3β표체수평명현감저(P＜0.01).여Aβ1-42조상비,Aβ1-42+Sar 30화100 μmol·L-1조해마신경원SYP,p-Akt화p-GSK3β표체수평명현증가(P＜0.01).급여LY294002작용후,SYP화p-Akt표체수평명현강저(P＜0.05).급여곡서립빈작용후,SYP화p-GSK3β표체수평명현강저(P＜0.05).단독급여LY294002,해마신경원SYP표체무변화,p-Akt표체수평명현강저(P＜0.01).단독급여곡서립빈,해마신경원SYP화p-GSK3β단백표체수평명현강저(P＜0.01).결론 Sar통과상조PI3K/Akt/GSK3β신호통로대항Aβ1-42유도적해마신경원돌촉손상.
