中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
4期
629-634
,共6页
王立军%金英%隋海娟%屈文慧%郁盛雪%金迎新%李洪秀
王立軍%金英%隋海娟%屈文慧%鬱盛雪%金迎新%李洪秀
왕립군%금영%수해연%굴문혜%욱성설%금영신%리홍수
知母皂苷元%淀粉样B蛋白%海马神经元%突触囊泡蛋白%细胞凋亡
知母皂苷元%澱粉樣B蛋白%海馬神經元%突觸囊泡蛋白%細胞凋亡
지모조감원%정분양B단백%해마신경원%돌촉낭포단백%세포조망
Key words: sarsasapogenin%hippocampal neurons%synaptophysin%post-synaptic density protein 95%apoptosis
目的 探讨知母皂苷元(Sar)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)引起的海马神经元损伤是否有保护作用.方法 取出生24 h内SD乳大鼠海马神经元,体外培养7d,先加入Sar 10,30和100 μmol·L-1作用1h,然后加入Aβ1-42 50 nmol· L-1作用24 h.应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白2(MAP2)免疫荧光染色观察神经元树突的生长;应用Hoechst33258核染色检测神经元凋亡;Western蛋白质印迹法检测海马神经元突触囊泡蛋白(SYP)、突触后致密蛋白95(PSD95)和活性胱天蛋白酶3表达.结果 加入Aβ1-42作用24 h,可使培养海马神经元树突静脉曲张样改变和突起回缩,树突总长度和末梢分枝数明显减少.与正常对照组相比,SYP和PSD95蛋白表达水平明显降低(P＜0.01),神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3蛋白表达水平明显升高(P＜0.01).与Aβ1-42模型组相比,先分别加入Sar 30和100 iμmol·L-1可明显对抗Aβ1-42引起的这些改变,培养海马神经元树突总长度(μm)和末梢分枝数从277 ±76和6±2分别增加到359±144和8±3以及370±158和8±3,神经元SYP和PSD95蛋白表达水平明显增加(P＜0.01),神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3表达水平明显降低(P＜0.01).结论 Sar能够改善Aβ1-42引起的海马神经元损伤.
目的 探討知母皂苷元(Sar)對澱粉樣β蛋白片段1-42(Aβ1-42)引起的海馬神經元損傷是否有保護作用.方法 取齣生24 h內SD乳大鼠海馬神經元,體外培養7d,先加入Sar 10,30和100 μmol·L-1作用1h,然後加入Aβ1-42 50 nmol· L-1作用24 h.應用倒置相差顯微鏡和微管相關蛋白2(MAP2)免疫熒光染色觀察神經元樹突的生長;應用Hoechst33258覈染色檢測神經元凋亡;Western蛋白質印跡法檢測海馬神經元突觸囊泡蛋白(SYP)、突觸後緻密蛋白95(PSD95)和活性胱天蛋白酶3錶達.結果 加入Aβ1-42作用24 h,可使培養海馬神經元樹突靜脈麯張樣改變和突起迴縮,樹突總長度和末梢分枝數明顯減少.與正常對照組相比,SYP和PSD95蛋白錶達水平明顯降低(P＜0.01),神經元凋亡細胞百分率和活性胱天蛋白酶3蛋白錶達水平明顯升高(P＜0.01).與Aβ1-42模型組相比,先分彆加入Sar 30和100 iμmol·L-1可明顯對抗Aβ1-42引起的這些改變,培養海馬神經元樹突總長度(μm)和末梢分枝數從277 ±76和6±2分彆增加到359±144和8±3以及370±158和8±3,神經元SYP和PSD95蛋白錶達水平明顯增加(P＜0.01),神經元凋亡細胞百分率和活性胱天蛋白酶3錶達水平明顯降低(P＜0.01).結論 Sar能夠改善Aβ1-42引起的海馬神經元損傷.
목적 탐토지모조감원(Sar)대정분양β단백편단1-42(Aβ1-42)인기적해마신경원손상시부유보호작용.방법 취출생24 h내SD유대서해마신경원,체외배양7d,선가입Sar 10,30화100 μmol·L-1작용1h,연후가입Aβ1-42 50 nmol· L-1작용24 h.응용도치상차현미경화미관상관단백2(MAP2)면역형광염색관찰신경원수돌적생장;응용Hoechst33258핵염색검측신경원조망;Western단백질인적법검측해마신경원돌촉낭포단백(SYP)、돌촉후치밀단백95(PSD95)화활성광천단백매3표체.결과 가입Aβ1-42작용24 h,가사배양해마신경원수돌정맥곡장양개변화돌기회축,수돌총장도화말소분지수명현감소.여정상대조조상비,SYP화PSD95단백표체수평명현강저(P＜0.01),신경원조망세포백분솔화활성광천단백매3단백표체수평명현승고(P＜0.01).여Aβ1-42모형조상비,선분별가입Sar 30화100 iμmol·L-1가명현대항Aβ1-42인기적저사개변,배양해마신경원수돌총장도(μm)화말소분지수종277 ±76화6±2분별증가도359±144화8±3이급370±158화8±3,신경원SYP화PSD95단백표체수평명현증가(P＜0.01),신경원조망세포백분솔화활성광천단백매3표체수평명현강저(P＜0.01).결론 Sar능구개선Aβ1-42인기적해마신경원손상.
