草地学报
草地學報
초지학보
ACTA AGRESTIA SINICA
2013年
5期
1005-1011
,共7页
厉秀秀%方玉鹏%赖毕%梁洁%李勤凡
厲秀秀%方玉鵬%賴畢%樑潔%李勤凡
려수수%방옥붕%뢰필%량길%리근범
内生真菌%黄连%小檗碱
內生真菌%黃連%小檗堿
내생진균%황련%소벽감
Endophytic fungi%Coptis chinensis Franch.%Berberine
为探索黄连中是否存在产小檗碱的内生真菌,采用组织块法对黄连(Coptis chinensis Franch.)中的内生真菌进行分离,以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠埃希菌(Escherichia coli)为指示菌,用琼脂块法对分离的内生真菌进行抑菌活性试验,经摇瓶发酵培养后,用薄层层析法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)检测其代谢产物中的小檗碱,并对其产量进行分析,采用形态学和分子生物学相结合的方法对产小檗碱内生真菌进行鉴定.结果表明:共分离获得12株内生真菌,其中菌株HL-BC对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性,TLC和HPLC检测结果显示,内生真菌HL-BC的发酵液中含有小檗碱,含量为0.664mg· L-1,根据形态学特征和5.8S rDNA-ITS序列分析,将其确定为拟茎点霉属(Phomopsis).这表明黄连中存在能产生小檗碱的内生真菌,为发酵生产小檗碱及黄连的综合开发奠定了理论基础.
為探索黃連中是否存在產小檗堿的內生真菌,採用組織塊法對黃連(Coptis chinensis Franch.)中的內生真菌進行分離,以金黃色葡萄毬菌(Staphylococcus aureus)和大腸埃希菌(Escherichia coli)為指示菌,用瓊脂塊法對分離的內生真菌進行抑菌活性試驗,經搖瓶髮酵培養後,用薄層層析法(TLC)和高效液相色譜法(HPLC)檢測其代謝產物中的小檗堿,併對其產量進行分析,採用形態學和分子生物學相結閤的方法對產小檗堿內生真菌進行鑒定.結果錶明:共分離穫得12株內生真菌,其中菌株HL-BC對金黃色葡萄毬菌具有較彊的抑菌活性,TLC和HPLC檢測結果顯示,內生真菌HL-BC的髮酵液中含有小檗堿,含量為0.664mg· L-1,根據形態學特徵和5.8S rDNA-ITS序列分析,將其確定為擬莖點黴屬(Phomopsis).這錶明黃連中存在能產生小檗堿的內生真菌,為髮酵生產小檗堿及黃連的綜閤開髮奠定瞭理論基礎.
위탐색황련중시부존재산소벽감적내생진균,채용조직괴법대황련(Coptis chinensis Franch.)중적내생진균진행분리,이금황색포도구균(Staphylococcus aureus)화대장애희균(Escherichia coli)위지시균,용경지괴법대분리적내생진균진행억균활성시험,경요병발효배양후,용박층층석법(TLC)화고효액상색보법(HPLC)검측기대사산물중적소벽감,병대기산량진행분석,채용형태학화분자생물학상결합적방법대산소벽감내생진균진행감정.결과표명:공분리획득12주내생진균,기중균주HL-BC대금황색포도구균구유교강적억균활성,TLC화HPLC검측결과현시,내생진균HL-BC적발효액중함유소벽감,함량위0.664mg· L-1,근거형태학특정화5.8S rDNA-ITS서렬분석,장기학정위의경점매속(Phomopsis).저표명황련중존재능산생소벽감적내생진균,위발효생산소벽감급황련적종합개발전정료이론기출.
