作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2013年
9期
1538-1547
,共10页
李双双%刘国政%陈志文%王玉美%华金平
李雙雙%劉國政%陳誌文%王玉美%華金平
리쌍쌍%류국정%진지문%왕옥미%화금평
棉花%线粒体DNA%细胞质雄性不育%orf160
棉花%線粒體DNA%細胞質雄性不育%orf160
면화%선립체DNA%세포질웅성불육%orf160
Gossypium%Mitochondrial DNA%Cytoplasmic male sterility%orf160
以哈克尼西棉细胞质陆地棉雄性不育系及其保持系、恢复系为材料,克隆并测序线粒体功能基因的侧翼序列.通过生物信息学分析,在atp4下游发现一个哈克尼西棉细胞质不育系特有的orf1 60.orf1 60全长480 bp,N端与atp6序列部分同源,C端序列与核序列部分同源;编码的159个氨基酸序列,与膜蛋白、细胞周期蛋白具有部分同源性.以含有线粒体导肽的GFP瞬时表达载体转化后,在洋葱表皮的细胞膜上观察到绿色荧光,表明线粒体定向载体正常表达.构建酵母和植物表达载体,分别转化酵母、烟草和拟南芥;同对照相比,转基因酵母菌斑畸形且生长缓慢;转基因拟南芥和烟草种子大部分畸形,T1和T2代植株的结实率和种子发芽率降低,花粉着色比野生型浅.结果表明,orf160基因的表达影响受体正常发育.
以哈剋尼西棉細胞質陸地棉雄性不育繫及其保持繫、恢複繫為材料,剋隆併測序線粒體功能基因的側翼序列.通過生物信息學分析,在atp4下遊髮現一箇哈剋尼西棉細胞質不育繫特有的orf1 60.orf1 60全長480 bp,N耑與atp6序列部分同源,C耑序列與覈序列部分同源;編碼的159箇氨基痠序列,與膜蛋白、細胞週期蛋白具有部分同源性.以含有線粒體導肽的GFP瞬時錶達載體轉化後,在洋蔥錶皮的細胞膜上觀察到綠色熒光,錶明線粒體定嚮載體正常錶達.構建酵母和植物錶達載體,分彆轉化酵母、煙草和擬南芥;同對照相比,轉基因酵母菌斑畸形且生長緩慢;轉基因擬南芥和煙草種子大部分畸形,T1和T2代植株的結實率和種子髮芽率降低,花粉著色比野生型淺.結果錶明,orf160基因的錶達影響受體正常髮育.
이합극니서면세포질륙지면웅성불육계급기보지계、회복계위재료,극륭병측서선립체공능기인적측익서렬.통과생물신식학분석,재atp4하유발현일개합극니서면세포질불육계특유적orf1 60.orf1 60전장480 bp,N단여atp6서렬부분동원,C단서렬여핵서렬부분동원;편마적159개안기산서렬,여막단백、세포주기단백구유부분동원성.이함유선립체도태적GFP순시표체재체전화후,재양총표피적세포막상관찰도록색형광,표명선립체정향재체정상표체.구건효모화식물표체재체,분별전화효모、연초화의남개;동대조상비,전기인효모균반기형차생장완만;전기인의남개화연초충자대부분기형,T1화T2대식주적결실솔화충자발아솔강저,화분착색비야생형천.결과표명,orf160기인적표체영향수체정상발육.