稳定转染pGM-CSF基因的哺乳动物细胞系的建立
은정전염pGM-CSF기인적포유동물세포계적건립
Establishment of mammalian animal cell line stably transfected with porcine GM-CSF gene
  • 万方数据
    中国兽医杂志 중국수의잡지
    CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
    2013年 8期 6-8,12 ,共4页

    陶弼菲%高其双%陈志华%向敏%占才耀%钱运国%夏瑜%华娟%王莲芳

    도필비%고기쌍%진지화%향민%점재요%전운국%하유%화연%왕련방

    猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子%哺乳动物细胞%稳定转染%蛋白表达 豬粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子%哺乳動物細胞%穩定轉染%蛋白錶達
    저립세포-거서세포집락자격인자%포유동물세포%은정전염%단백표체
    构建稳定表达猪pGM-CSF基因的细胞系可以为工业化生产猪pGM-CSF并将其应用于新型兽药的开发提供生产细胞源.本试验用脂质体介导法将真核表达载体plRES2-EGFP-pGM-CSF瞬时转染BHK-21细胞,通过不同浓度的G418加压筛选和进一步采用单个克隆法筛选,建立稳定转染且高效表达pGM-CSF的BHK-21细胞株9个,采用Elisa方法测定稳定转染pGM-CSF的BHK-21细胞株细胞培养上清液中pGM-CSF的表达水平达到329.37士13.76 ng/mL.为下一步从细胞培养物中大量提取目的蛋白并最终开发出一种用于提高动物疫苗免疫效力的新型生物制剂奠定基础.
    구건은정표체저pGM-CSF기인적세포계가이위공업화생산저pGM-CSF병장기응용우신형수약적개발제공생산세포원.본시험용지질체개도법장진핵표체재체plRES2-EGFP-pGM-CSF순시전염BHK-21세포,통과불동농도적G418가압사선화진일보채용단개극륭법사선,건립은정전염차고효표체pGM-CSF적BHK-21세포주9개,채용Elisa방법측정은정전염pGM-CSF적BHK-21세포주세포배양상청액중pGM-CSF적표체수평체도329.37사13.76 ng/mL.위하일보종세포배양물중대량제취목적단백병최종개발출일충용우제고동물역묘면역효력적신형생물제제전정기출.
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