中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2013年
8期
3-5
,共3页
斯日古楞%么宏强%马学恩%周建华
斯日古楞%麽宏彊%馬學恩%週建華
사일고릉%요굉강%마학은%주건화
绵羊肺腺瘤病病毒%CA基因%真核表达%间接免疫荧光法%Western blotting法
綿羊肺腺瘤病病毒%CA基因%真覈錶達%間接免疫熒光法%Western blotting法
면양폐선류병병독%CA기인%진핵표체%간접면역형광법%Western blotting법
为构建绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte Sheep Retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)基因真核表达载体,采用含HA标签的引物,通过PCR方法从重组原核表达质粒上扩增CA-HA融合基因片段,将其克隆至真核表达载体上.构建的真核表达质粒通过脂质体法转染293细胞和Hela细胞,用间接免疫荧光和Westhern blotting法检测目的蛋白的表达.结果表明,成功地构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CA-HA,并转染的293细胞和Hela细胞内观察到特异性荧光和检测到目的基因的表达产物,说明CA基因在真核细胞内获得表达.本试验为建立特异性的诊断试剂盒奠定了基础.
為構建綿羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte Sheep Retrovirus,JSRV)內矇株衣殼蛋白(CA)基因真覈錶達載體,採用含HA標籤的引物,通過PCR方法從重組原覈錶達質粒上擴增CA-HA融閤基因片段,將其剋隆至真覈錶達載體上.構建的真覈錶達質粒通過脂質體法轉染293細胞和Hela細胞,用間接免疫熒光和Westhern blotting法檢測目的蛋白的錶達.結果錶明,成功地構建真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)-CA-HA,併轉染的293細胞和Hela細胞內觀察到特異性熒光和檢測到目的基因的錶達產物,說明CA基因在真覈細胞內穫得錶達.本試驗為建立特異性的診斷試劑盒奠定瞭基礎.
위구건면양폐선류병독(Jaagsiekte Sheep Retrovirus,JSRV)내몽주의각단백(CA)기인진핵표체재체,채용함HA표첨적인물,통과PCR방법종중조원핵표체질립상확증CA-HA융합기인편단,장기극륭지진핵표체재체상.구건적진핵표체질립통과지질체법전염293세포화Hela세포,용간접면역형광화Westhern blotting법검측목적단백적표체.결과표명,성공지구건진핵표체질립pcDNA3.1(+)-CA-HA,병전염적293세포화Hela세포내관찰도특이성형광화검측도목적기인적표체산물,설명CA기인재진핵세포내획득표체.본시험위건립특이성적진단시제합전정료기출.
