CAJ | 학술논문

为研究不同诱导方法对香鱼(Plecoglossus altivelis)人工雌核发育的影响,本研究采用紫外线灭活同源精子刺激卵子发育、冷刺激法、热刺激法和静水压法抑制受精卵第二极体排出诱导香鱼雌核发育,并采用微卫星(SSR)标记和相关序列扩增多态性(SRAP)标记分析了雌核发育子代样本的遗传特征.结果表明,香鱼雌核发育冷刺激组受精率、发眼率和孵化率分别为(39.6±2.5)％、(25.3±3.5)％和(6.7±1.2)％;热刺激组受精率、发眼率和孵化率分别为(61.0±2.0)％、(34.7±2.1)％和(11.0±2.0)％;静水压组受精卵、发眼率和孵化率分别为(80.3±2.1)％、(66.3±1.5)％和(57.0±2.0)％,诱导方法以静水压法最佳,孵化率显著高于冷刺激组和热刺激组(P＜0.01),15日龄子代存活率为(15.2±8.2)％,而冷刺激组存活率低于1％,热刺激组未发现存活个体.SSR标记分析表明,静水压法可以通过抑制第二极体排出诱导香鱼雌核发育,受检测的16尾子代标本有14尾未出现父本条带,15日龄鱼苗雌核发育比例达87.5％.雌核发育子代在Pag-003位点均为纯合子,但着丝点与Pag-051和Pag-076位点之间的重组率分别为28.6％和93.3％.SRAP标记K-group引物组合在母本中扩增出5条带,其中母本特有条带4条,父本中扩增出4条清晰带,其中父本特有条带3条.母本特有条带a4在14尾雌核发育子代标本中出现的比例(显隐性比)为l∶1(P=l.000),条带al、a3和a5在后代中的显隐性比例基本符合孟德尔定律(1.33∶1)(P=0.705); SRAP标记P-group引物组合在母本中仅能扩增出1条带,无母本特异条带,父本中扩增出8条带,父本特有条带7条.No.7和No.14标本检测到父本特有条带,属于精子灭活不完全鱼苗(12.5％).与微卫星标记相比,SRAP标记可通过一次反应可同时实现对香鱼基因组多个位点检测,获得更多的遗传信息.本研究数据显示静水压技术可用于香鱼人工雌核发育诱导,研究结果对大陆地区香鱼良种培育具有重要的理论指导意义和实际应用价值. 為研究不同誘導方法對香魚(Plecoglossus altivelis)人工雌覈髮育的影響,本研究採用紫外線滅活同源精子刺激卵子髮育、冷刺激法、熱刺激法和靜水壓法抑製受精卵第二極體排齣誘導香魚雌覈髮育,併採用微衛星(SSR)標記和相關序列擴增多態性(SRAP)標記分析瞭雌覈髮育子代樣本的遺傳特徵.結果錶明,香魚雌覈髮育冷刺激組受精率、髮眼率和孵化率分彆為(39.6±2.5)％、(25.3±3.5)％和(6.7±1.2)％;熱刺激組受精率、髮眼率和孵化率分彆為(61.0±2.0)％、(34.7±2.1)％和(11.0±2.0)％;靜水壓組受精卵、髮眼率和孵化率分彆為(80.3±2.1)％、(66.3±1.5)％和(57.0±2.0)％,誘導方法以靜水壓法最佳,孵化率顯著高于冷刺激組和熱刺激組(P＜0.01),15日齡子代存活率為(15.2±8.2)％,而冷刺激組存活率低于1％,熱刺激組未髮現存活箇體.SSR標記分析錶明,靜水壓法可以通過抑製第二極體排齣誘導香魚雌覈髮育,受檢測的16尾子代標本有14尾未齣現父本條帶,15日齡魚苗雌覈髮育比例達87.5％.雌覈髮育子代在Pag-003位點均為純閤子,但著絲點與Pag-051和Pag-076位點之間的重組率分彆為28.6％和93.3％.SRAP標記K-group引物組閤在母本中擴增齣5條帶,其中母本特有條帶4條,父本中擴增齣4條清晰帶,其中父本特有條帶3條.母本特有條帶a4在14尾雌覈髮育子代標本中齣現的比例(顯隱性比)為l∶1(P=l.000),條帶al、a3和a5在後代中的顯隱性比例基本符閤孟德爾定律(1.33∶1)(P=0.705); SRAP標記P-group引物組閤在母本中僅能擴增齣1條帶,無母本特異條帶,父本中擴增齣8條帶,父本特有條帶7條.No.7和No.14標本檢測到父本特有條帶,屬于精子滅活不完全魚苗(12.5％).與微衛星標記相比,SRAP標記可通過一次反應可同時實現對香魚基因組多箇位點檢測,穫得更多的遺傳信息.本研究數據顯示靜水壓技術可用于香魚人工雌覈髮育誘導,研究結果對大陸地區香魚良種培育具有重要的理論指導意義和實際應用價值.
위연구불동유도방법대향어(Plecoglossus altivelis)인공자핵발육적영향,본연구채용자외선멸활동원정자자격란자발육、랭자격법、열자격법화정수압법억제수정란제이겁체배출유도향어자핵발육,병채용미위성(SSR)표기화상관서렬확증다태성(SRAP)표기분석료자핵발육자대양본적유전특정.결과표명,향어자핵발육랭자격조수정솔、발안솔화부화솔분별위(39.6±2.5)％、(25.3±3.5)％화(6.7±1.2)％;열자격조수정솔、발안솔화부화솔분별위(61.0±2.0)％、(34.7±2.1)％화(11.0±2.0)％;정수압조수정란、발안솔화부화솔분별위(80.3±2.1)％、(66.3±1.5)％화(57.0±2.0)％,유도방법이정수압법최가,부화솔현저고우랭자격조화열자격조(P＜0.01),15일령자대존활솔위(15.2±8.2)％,이랭자격조존활솔저우1％,열자격조미발현존활개체.SSR표기분석표명,정수압법가이통과억제제이겁체배출유도향어자핵발육,수검측적16미자대표본유14미미출현부본조대,15일령어묘자핵발육비례체87.5％.자핵발육자대재Pag-003위점균위순합자,단착사점여Pag-051화Pag-076위점지간적중조솔분별위28.6％화93.3％.SRAP표기K-group인물조합재모본중확증출5조대,기중모본특유조대4조,부본중확증출4조청석대,기중부본특유조대3조.모본특유조대a4재14미자핵발육자대표본중출현적비례(현은성비)위l∶1(P=l.000),조대al、a3화a5재후대중적현은성비례기본부합맹덕이정률(1.33∶1)(P=0.705); SRAP표기P-group인물조합재모본중부능확증출1조대,무모본특이조대,부본중확증출8조대,부본특유조대7조.No.7화No.14표본검측도부본특유조대,속우정자멸활불완전어묘(12.5％).여미위성표기상비,SRAP표기가통과일차반응가동시실현대향어기인조다개위점검측,획득경다적유전신식.본연구수거현시정수압기술가용우향어인공자핵발육유도,연구결과대대륙지구향어량충배육구유중요적이론지도의의화실제응용개치.