CAJ | 학술논문

间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)来源于中胚层的多潜能干细胞,具有分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞等终末分化细胞的能力.本实验研究了hedgehog信号通路的特异性抑制剂环巴胺(cyclopamine,CPA)对牛(Bos taurus)脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cells,AMSCs)的细胞分裂周期及成骨与成脂诱导分化的影响.首先获得牛AMSCs,然后用CPA处理AMSCs,用流式细胞仪分析和Real-time PCR方法检测CPA对细胞周期及定向分化过程中关键基因表达的影响.结果显示,CPA以剂量依赖的方式影响AMSCs的细胞周期进程,并且引起细胞停滞在G0/G1期;后经成脂和成骨诱导后,细胞形态没有显著变化;但是用Real-time PCR的方法检测诱导分化过程中成脂分化关键基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)与成骨分化关键基因成骨细胞转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达量显示,CPA对两种分化相关基因的表达量都有显著影响:在成脂分化过程中,4d后处理组的PPARγ比对照组的表达量显著提高(P＜0.01);在成骨分化过程中,处理组Runx的表达量从开始一直显著低于对照组(P＜0.01).结果表明,CPA处理对成脂与成骨没有形态学方面的影响,但是能够引起关键基因表达量的显著变化.研究结果为研究hedgehog 信号通路在间充质干细胞的增殖与分化过程中的作用提供参考依据.
간충질간세포(mesenchymal stem cell,MSC)래원우중배층적다잠능간세포,구유분화위성골세포、연골세포화지방세포등종말분화세포적능력.본실험연구료hedgehog신호통로적특이성억제제배파알(cyclopamine,CPA)대우(Bos taurus)지방간충질간세포(adipose mesenchymal stem cells,AMSCs)적세포분렬주기급성골여성지유도분화적영향.수선획득우AMSCs,연후용CPA처리AMSCs,용류식세포의분석화Real-time PCR방법검측CPA대세포주기급정향분화과정중관건기인표체적영향.결과현시,CPA이제량의뢰적방식영향AMSCs적세포주기진정,병차인기세포정체재G0/G1기;후경성지화성골유도후,세포형태몰유현저변화;단시용Real-time PCR적방법검측유도분화과정중성지분화관건기인과양화물매체증식물격활수체γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)여성골분화관건기인성골세포전록인자2(runt-related transcription factor 2,Runx2)적표체량현시,CPA대량충분화상관기인적표체량도유현저영향:재성지분화과정중,4d후처리조적PPARγ비대조조적표체량현저제고(P＜0.01);재성골분화과정중,처리조Runx적표체량종개시일직현저저우대조조(P＜0.01).결과표명,CPA처리대성지여성골몰유형태학방면적영향,단시능구인기관건기인표체량적현저변화.연구결과위연구hedgehog 신호통로재간충질간세포적증식여분화과정중적작용제공삼고의거.