山西医药杂志
山西醫藥雜誌
산서의약잡지
SHANXI MEDICAL JOURNAL
2013年
17期
986-988
,共3页
魏朝辉%陈涛%杨文成%李艳红%乔剑侠%孙艳%蒙艳凤%杨国稳%徐学新
魏朝輝%陳濤%楊文成%李豔紅%喬劍俠%孫豔%矇豔鳳%楊國穩%徐學新
위조휘%진도%양문성%리염홍%교검협%손염%몽염봉%양국은%서학신
白血病%间质干细胞%细胞凋亡%K562细胞
白血病%間質榦細胞%細胞凋亡%K562細胞
백혈병%간질간세포%세포조망%K562세포
Leukemia%Mesenchymal stem cell%Apoptosis%K562 cell
目的 采用血清饥饿法诱导K562细胞凋亡,比较K562细胞与人白血病骨髓间充质干细胞(LMSC)共培养前后,K562细胞凋亡的变化,并进一步探讨其可能涉及到的信号转导通路(PI3K/Akt/Bad),为临床靶向治疗白血病提供依据.方法 采用膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)荧光标记法检测血清饥饿后和与LMSC共培养后K562细胞凋亡的变化.蛋白印迹法检测与LMSC共培养后及加入磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性阻断剂LY294002后,K562细胞中Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的变化.结果 10％胎牛血清(FBS)培养时,K562细胞凋亡率为(4.87±0.09)％,FBS饥饿培养24 h后,K562细胞凋亡率为(10.14±0.50)％,较10％FBS培养明显升高(P＜0.05).与LMSC共培养后,K562细胞凋亡率为(7.15±0.06)％,细胞凋亡率较FBS饥饿培养下降(P＜0.05).进一步蛋白印迹法检测发现,K562细胞在单独悬浮培养条件下,即有Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的表达；与LMSC共培养后,p-Akt、p-Bad的表达量显著升高(P＜0.05),在共培养体系中加入PI3K特异性抑制剂LY294002后,p-Akt、p-Bad的表达量明显下降(P＜0.05)；而3组间Akt、Bad蛋白的表达量未见明显变化(P＞0.05).结论 ①LMSC能够抑制血清饥饿诱导的K562细胞凋亡.②其涉及到的信号转导通路可能为PI3K/Akt/Bad.③PI3K/Akt/Bad可作为白血病靶向治疗的新的作用靶点.
目的 採用血清饑餓法誘導K562細胞凋亡,比較K562細胞與人白血病骨髓間充質榦細胞(LMSC)共培養前後,K562細胞凋亡的變化,併進一步探討其可能涉及到的信號轉導通路(PI3K/Akt/Bad),為臨床靶嚮治療白血病提供依據.方法 採用膜聯蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)熒光標記法檢測血清饑餓後和與LMSC共培養後K562細胞凋亡的變化.蛋白印跡法檢測與LMSC共培養後及加入燐脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特異性阻斷劑LY294002後,K562細胞中Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的變化.結果 10％胎牛血清(FBS)培養時,K562細胞凋亡率為(4.87±0.09)％,FBS饑餓培養24 h後,K562細胞凋亡率為(10.14±0.50)％,較10％FBS培養明顯升高(P＜0.05).與LMSC共培養後,K562細胞凋亡率為(7.15±0.06)％,細胞凋亡率較FBS饑餓培養下降(P＜0.05).進一步蛋白印跡法檢測髮現,K562細胞在單獨懸浮培養條件下,即有Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的錶達；與LMSC共培養後,p-Akt、p-Bad的錶達量顯著升高(P＜0.05),在共培養體繫中加入PI3K特異性抑製劑LY294002後,p-Akt、p-Bad的錶達量明顯下降(P＜0.05)；而3組間Akt、Bad蛋白的錶達量未見明顯變化(P＞0.05).結論 ①LMSC能夠抑製血清饑餓誘導的K562細胞凋亡.②其涉及到的信號轉導通路可能為PI3K/Akt/Bad.③PI3K/Akt/Bad可作為白血病靶嚮治療的新的作用靶點.
목적 채용혈청기아법유도K562세포조망,비교K562세포여인백혈병골수간충질간세포(LMSC)공배양전후,K562세포조망적변화,병진일보탐토기가능섭급도적신호전도통로(PI3K/Akt/Bad),위림상파향치료백혈병제공의거.방법 채용막련단백V/전화병정(Annexin V/PI)형광표기법검측혈청기아후화여LMSC공배양후K562세포조망적변화.단백인적법검측여LMSC공배양후급가입린지선기순-3-격매(PI3K)특이성조단제LY294002후,K562세포중Akt、p-Akt、Bad、p-Bad단백적변화.결과 10％태우혈청(FBS)배양시,K562세포조망솔위(4.87±0.09)％,FBS기아배양24 h후,K562세포조망솔위(10.14±0.50)％,교10％FBS배양명현승고(P＜0.05).여LMSC공배양후,K562세포조망솔위(7.15±0.06)％,세포조망솔교FBS기아배양하강(P＜0.05).진일보단백인적법검측발현,K562세포재단독현부배양조건하,즉유Akt、p-Akt、Bad、p-Bad단백적표체；여LMSC공배양후,p-Akt、p-Bad적표체량현저승고(P＜0.05),재공배양체계중가입PI3K특이성억제제LY294002후,p-Akt、p-Bad적표체량명현하강(P＜0.05)；이3조간Akt、Bad단백적표체량미견명현변화(P＞0.05).결론 ①LMSC능구억제혈청기아유도적K562세포조망.②기섭급도적신호전도통로가능위PI3K/Akt/Bad.③PI3K/Akt/Bad가작위백혈병파향치료적신적작용파점.
