广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
17期
133-136
,共4页
刘敏%许厚强%陈伟%陈祥%李飞
劉敏%許厚彊%陳偉%陳祥%李飛
류민%허후강%진위%진상%리비
MSTN基因%启动子%荧光素酶%C2C12%3T3-L1
MSTN基因%啟動子%熒光素酶%C2C12%3T3-L1
MSTN기인%계동자%형광소매%C2C12%3T3-L1
采用PCR技术扩增牛MSTN基因启子,亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建重组报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter.将重组报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter与内参质粒pRL-TK用脂质体法瞬时共转染小鼠成肌细胞系C2C12和小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1,通过双荧光素酶活性检测其启动子活性.测序结果表明,成功构建了牛MSTN基因真核报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter,瞬时转染试验表明,pGL3-Basic-MSTN-promoter在C2C12细胞和3T3-L1细胞中的启动子活性分别为pGL3-Basic空载体的14.53倍、5.02倍.研究结果为进一步研究MSTN基因的表达调控机制奠定了基础.
採用PCR技術擴增牛MSTN基因啟子,亞剋隆至熒光素酶錶達載體pGL3-Basic中,構建重組報告載體pGL3-Basic-MSTN-promoter.將重組報告載體pGL3-Basic-MSTN-promoter與內參質粒pRL-TK用脂質體法瞬時共轉染小鼠成肌細胞繫C2C12和小鼠胚胎成纖維細胞3T3-L1,通過雙熒光素酶活性檢測其啟動子活性.測序結果錶明,成功構建瞭牛MSTN基因真覈報告載體pGL3-Basic-MSTN-promoter,瞬時轉染試驗錶明,pGL3-Basic-MSTN-promoter在C2C12細胞和3T3-L1細胞中的啟動子活性分彆為pGL3-Basic空載體的14.53倍、5.02倍.研究結果為進一步研究MSTN基因的錶達調控機製奠定瞭基礎.
채용PCR기술확증우MSTN기인계자,아극륭지형광소매표체재체pGL3-Basic중,구건중조보고재체pGL3-Basic-MSTN-promoter.장중조보고재체pGL3-Basic-MSTN-promoter여내삼질립pRL-TK용지질체법순시공전염소서성기세포계C2C12화소서배태성섬유세포3T3-L1,통과쌍형광소매활성검측기계동자활성.측서결과표명,성공구건료우MSTN기인진핵보고재체pGL3-Basic-MSTN-promoter,순시전염시험표명,pGL3-Basic-MSTN-promoter재C2C12세포화3T3-L1세포중적계동자활성분별위pGL3-Basic공재체적14.53배、5.02배.연구결과위진일보연구MSTN기인적표체조공궤제전정료기출.
