西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
5期
1847-1851
,共5页
吴柳%张政%卢业飞%秦秀林%刘君梁%冯家勋
吳柳%張政%盧業飛%秦秀林%劉君樑%馮傢勛
오류%장정%로업비%진수림%류군량%풍가훈
哈茨木霉%纤维二糖水解酶%基因克隆%表达
哈茨木黴%纖維二糖水解酶%基因剋隆%錶達
합자목매%섬유이당수해매%기인극륭%표체
Trichoderma harzianum%Cellobiohydrolase Ⅰ%Gene cloning%Expression
从哈茨木霉(Trichoderma harzianum)HP37-4中克隆得到纤维二糖水解酶Ⅰ基因的全长DNA序列,并从HP37-4总RNA中通过RT-PCR扩增得到该基因全长cDNA序列.序列测定分析表明该基因含有3个外显子和2个内含子,编码含505个氨基酸的多肽.利用生物信息学方法对该蛋白质的结构进行了分析,推测了其主要功能区的位置及结构特征.将该基因cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,在大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达该基因.SDS-PAGE分析表明该基因能在大肠杆菌中过量表达,但以不溶性的包涵体形式存在,经包涵体变性和多肽复性后,纯化得到了表达的重组蛋白.
從哈茨木黴(Trichoderma harzianum)HP37-4中剋隆得到纖維二糖水解酶Ⅰ基因的全長DNA序列,併從HP37-4總RNA中通過RT-PCR擴增得到該基因全長cDNA序列.序列測定分析錶明該基因含有3箇外顯子和2箇內含子,編碼含505箇氨基痠的多肽.利用生物信息學方法對該蛋白質的結構進行瞭分析,推測瞭其主要功能區的位置及結構特徵.將該基因cDNA序列剋隆到大腸桿菌錶達載體pET30a(+)中,在大腸桿菌BL21 (DE3)中誘導錶達該基因.SDS-PAGE分析錶明該基因能在大腸桿菌中過量錶達,但以不溶性的包涵體形式存在,經包涵體變性和多肽複性後,純化得到瞭錶達的重組蛋白.
종합자목매(Trichoderma harzianum)HP37-4중극륭득도섬유이당수해매Ⅰ기인적전장DNA서렬,병종HP37-4총RNA중통과RT-PCR확증득도해기인전장cDNA서렬.서렬측정분석표명해기인함유3개외현자화2개내함자,편마함505개안기산적다태.이용생물신식학방법대해단백질적결구진행료분석,추측료기주요공능구적위치급결구특정.장해기인cDNA서렬극륭도대장간균표체재체pET30a(+)중,재대장간균BL21 (DE3)중유도표체해기인.SDS-PAGE분석표명해기인능재대장간균중과량표체,단이불용성적포함체형식존재,경포함체변성화다태복성후,순화득도료표체적중조단백.
