CAJ | 학술논문

目的:体外观察间充质干细胞(MSCs)对免疫性血小板减少症(ITP)患者CD4+ CD25+T细胞比例的影响.方法:采用Ficoll分离骨髓单个核细胞,通过体外培养,扩增出MSCs,通过Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取正常人及ITP患者外周血T淋巴细胞,并应用流式细胞术检测T细胞中CD4+ CD25+T细胞比例；MSCs经丝裂霉素MMC处理后按不同数量(2×103、1×104、5×104个细胞/孔)接种培养板作为基底层细胞,然后分别接种体外分离纯化的异体ITP及正常人T淋巴细胞,于2、4、6天后各自收集T淋巴细胞及培养上清,用流式细胞术检测接种于骨髓MSCs的ITP患者CD4+ CD25+T细胞比例.结果:ITP患者外周血CD4+ CD25+T细胞数量及CD4+ CD25+/CD4+比值均明显低于正常对照组(P＜0.05);在PHA作用下,数量＞1×104的骨髓MSCs与T淋巴细胞共培养4天后,与正常对照组相比,MSCs可显著上调ITP患者及正常人T淋巴细胞中CD4+ CD25+T淋巴细胞比例及CD4+ CD25 +/CD4+比值(P＜0.05),且随MSCs量的增加,作用增强(P＜0.05).体外骨髓MSCs对ITP患者CD4+ CD25+T淋巴细胞具有上调作用,以上这种机制可使ITP患者的细胞因子及CD4+ CD25+T淋巴细胞逐渐接近于正常人但仍达不到正常人水平(P＜0.05).结论:MSCs在体外可能通过上调CD4+ CD25+调节性T细胞,进而诱导ITP患者免疫耐受形成.
목적:체외관찰간충질간세포(MSCs)대면역성혈소판감소증(ITP)환자CD4+ CD25+T세포비례적영향.방법:채용Ficoll분리골수단개핵세포,통과체외배양,확증출MSCs,통과Ficoll분리법화니룡면주법획취정상인급ITP환자외주혈T림파세포,병응용류식세포술검측T세포중CD4+ CD25+T세포비례；MSCs경사렬매소MMC처리후안불동수량(2×103、1×104、5×104개세포/공)접충배양판작위기저층세포,연후분별접충체외분리순화적이체ITP급정상인T림파세포,우2、4、6천후각자수집T림파세포급배양상청,용류식세포술검측접충우골수MSCs적ITP환자CD4+ CD25+T세포비례.결과:ITP환자외주혈CD4+ CD25+T세포수량급CD4+ CD25+/CD4+비치균명현저우정상대조조(P＜0.05);재PHA작용하,수량＞1×104적골수MSCs여T림파세포공배양4천후,여정상대조조상비,MSCs가현저상조ITP환자급정상인T림파세포중CD4+ CD25+T림파세포비례급CD4+ CD25 +/CD4+비치(P＜0.05),차수MSCs량적증가,작용증강(P＜0.05).체외골수MSCs대ITP환자CD4+ CD25+T림파세포구유상조작용,이상저충궤제가사ITP환자적세포인자급CD4+ CD25+T림파세포축점접근우정상인단잉체불도정상인수평(P＜0.05).결론:MSCs재체외가능통과상조CD4+ CD25+조절성T세포,진이유도ITP환자면역내수형성.