国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2014年
4期
390-391,393
,共3页
彭杰雄%谭洪%陆建国%林连成%邓兆享%林文浩
彭傑雄%譚洪%陸建國%林連成%鄧兆享%林文浩
팽걸웅%담홍%륙건국%림련성%산조향%림문호
巨细胞病毒%载体%重组蛋白质类
巨細胞病毒%載體%重組蛋白質類
거세포병독%재체%중조단백질류
cytomegalovirus%victor%recombinant proteins
目的 构建人巨细胞病毒(HCMV)gB基因,并对pET28a/gB重组质粒进行诱导表达,鉴定表达的目的蛋白.方法 根据Genebank中HCMV核苷酸序列设计引物,并在引物的5'、3 '端分别加入BamHⅠ、EcoRⅠ限制性内切酶位点.特异性扩增gB编码基因片段,同时构建含HCMV gB编码基因的原核表达载体,对重组质粒进行诱导表达,用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法对纯化的Ni/gB融合蛋白的灵敏度和特异度等生物活性进行鉴定,灵敏度可达95％,特异度达96.7％.结果 目的蛋白经诱导后表达于上清液中,经鉴定,目的蛋白保留了天然蛋白原有的生物活性.结论 Ni/gB融合蛋白的获得,为研制以重组蛋白代替传统全病毒作为检测抗原的新型HCMV特异性免疫学检测试剂盒奠定了基础.
目的 構建人巨細胞病毒(HCMV)gB基因,併對pET28a/gB重組質粒進行誘導錶達,鑒定錶達的目的蛋白.方法 根據Genebank中HCMV覈苷痠序列設計引物,併在引物的5'、3 '耑分彆加入BamHⅠ、EcoRⅠ限製性內切酶位點.特異性擴增gB編碼基因片段,同時構建含HCMV gB編碼基因的原覈錶達載體,對重組質粒進行誘導錶達,用間接酶聯免疫吸附測定(ELISA)法對純化的Ni/gB融閤蛋白的靈敏度和特異度等生物活性進行鑒定,靈敏度可達95％,特異度達96.7％.結果 目的蛋白經誘導後錶達于上清液中,經鑒定,目的蛋白保留瞭天然蛋白原有的生物活性.結論 Ni/gB融閤蛋白的穫得,為研製以重組蛋白代替傳統全病毒作為檢測抗原的新型HCMV特異性免疫學檢測試劑盒奠定瞭基礎.
목적 구건인거세포병독(HCMV)gB기인,병대pET28a/gB중조질립진행유도표체,감정표체적목적단백.방법 근거Genebank중HCMV핵감산서렬설계인물,병재인물적5'、3 '단분별가입BamHⅠ、EcoRⅠ한제성내절매위점.특이성확증gB편마기인편단,동시구건함HCMV gB편마기인적원핵표체재체,대중조질립진행유도표체,용간접매련면역흡부측정(ELISA)법대순화적Ni/gB융합단백적령민도화특이도등생물활성진행감정,령민도가체95％,특이도체96.7％.결과 목적단백경유도후표체우상청액중,경감정,목적단백보류료천연단백원유적생물활성.결론 Ni/gB융합단백적획득,위연제이중조단백대체전통전병독작위검측항원적신형HCMV특이성면역학검측시제합전정료기출.
