棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2013年
2期
129-134
,共6页
李先良%李傲%彭良才%夏涛
李先良%李傲%彭良纔%夏濤
리선량%리오%팽량재%하도
棉纤维%纤维素合酶%复合体%次生壁
棉纖維%纖維素閤酶%複閤體%次生壁
면섬유%섬유소합매%복합체%차생벽
选用开花后24 d的棉纤维提取原生质膜,用Triton X-100溶解后通过纤维素合酶1(Gossypium hirsutum cellulose synthase1,GhCESAl)抗体进行免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP),以聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离免疫共沉淀的产物,用液相色谱-质谱联用仪(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)进行鉴定.结果表明,棉纤维纤维素合酶复合体可能存在68种蛋白,其中包括8种纤维素合酶(Cellolose synthse,CESA),它们涵盖了棉纤维初生壁和次生壁2种类型纤维素合酶.这说明在次生壁形成的细胞中存在2种类型CESA.本研究也表明复合体中存在非CESA蛋白.
選用開花後24 d的棉纖維提取原生質膜,用Triton X-100溶解後通過纖維素閤酶1(Gossypium hirsutum cellulose synthase1,GhCESAl)抗體進行免疫共沉澱(Co-Immunoprecipitation,Co-IP),以聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分離免疫共沉澱的產物,用液相色譜-質譜聯用儀(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)進行鑒定.結果錶明,棉纖維纖維素閤酶複閤體可能存在68種蛋白,其中包括8種纖維素閤酶(Cellolose synthse,CESA),它們涵蓋瞭棉纖維初生壁和次生壁2種類型纖維素閤酶.這說明在次生壁形成的細胞中存在2種類型CESA.本研究也錶明複閤體中存在非CESA蛋白.
선용개화후24 d적면섬유제취원생질막,용Triton X-100용해후통과섬유소합매1(Gossypium hirsutum cellulose synthase1,GhCESAl)항체진행면역공침정(Co-Immunoprecipitation,Co-IP),이취병희선알응효전영(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)분리면역공침정적산물,용액상색보-질보련용의(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)진행감정.결과표명,면섬유섬유소합매복합체가능존재68충단백,기중포괄8충섬유소합매(Cellolose synthse,CESA),타문함개료면섬유초생벽화차생벽2충류형섬유소합매.저설명재차생벽형성적세포중존재2충류형CESA.본연구야표명복합체중존재비CESA단백.
