1株髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒感染性克隆的构建与病毒拯救
1주수세포류형J아군금백혈병병독감염성극륭적구건여병독증구
Construction and Virus Rescue of Infectious Molecular Clones of Subgroup J Avian Myeloid Leukosis Virus
  • 万方数据
    畜牧兽医学报 축목수의학보

    2013年 5期 754-759 ,共6页

    林艳%夏静%邹年莉%郭明萍%王富妍%赵扬%文心田%曹三杰%黄勇

    림염%하정%추년리%곽명평%왕부연%조양%문심전%조삼걸%황용

    髓细胞瘤型%J亚群禽白血病病毒%感染性克隆%分子标记%病毒拯救 髓細胞瘤型%J亞群禽白血病病毒%感染性剋隆%分子標記%病毒拯救
    수세포류형%J아군금백혈병병독%감염성극륭%분자표기%병독증구
    myeloid leukosis%subgroup J avian leukosis virus%infectious molecular clone%molecular marker%virus rescue
    为构建髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-J) SCGS-1株前病毒cDNA分子标记感染性克隆,根据SCGS-1全基因测序结果,分3段进行全序列PCR扩增,顺次连接至pUC19,构建SCGS-1株前病毒cDNA感染性克隆pUC-SCGS;通过重叠PCR方法对SCGS-1基因组进行沉默突变,在4 684位点引入Sal I位点,构建SCGS-1株分子标记感染性克隆pUC-△SCGS;以pUC-SCGS和pUC-△SCGS重组质粒转染CEF进行病毒拯救,并通过PCR、间接免疫荧光与双抗体夹心ELISA进行拯救病毒检测.结果显示,成功构建pUC-SCGS与pUC-△SCGS重组质粒,转染后盲传第3代、第4代细胞与上清中均检测到拯救病毒;间接免疫荧光与抗原ELISA方法分别在CEF细胞和上清中检测到ALV-J抗原.成功拯救获得分子标记ALV-J.
    위구건수세포류형J아군금백혈병병독(avian leukosis virus,ALV-J) SCGS-1주전병독cDNA분자표기감염성극륭,근거SCGS-1전기인측서결과,분3단진행전서렬PCR확증,순차련접지pUC19,구건SCGS-1주전병독cDNA감염성극륭pUC-SCGS;통과중첩PCR방법대SCGS-1기인조진행침묵돌변,재4 684위점인입Sal I위점,구건SCGS-1주분자표기감염성극륭pUC-△SCGS;이pUC-SCGS화pUC-△SCGS중조질립전염CEF진행병독증구,병통과PCR、간접면역형광여쌍항체협심ELISA진행증구병독검측.결과현시,성공구건pUC-SCGS여pUC-△SCGS중조질립,전염후맹전제3대、제4대세포여상청중균검측도증구병독;간접면역형광여항원ELISA방법분별재CEF세포화상청중검측도ALV-J항원.성공증구획득분자표기ALV-J.
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