畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
6期
10-13
,共4页
三重聚合酶链式反应%牛病毒性腹泻病毒(BVDV)%牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)%牛副流感病毒3型(BPIV-3)
三重聚閤酶鏈式反應%牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)%牛呼吸道閤胞體病毒(BRSV)%牛副流感病毒3型(BPIV-3)
삼중취합매련식반응%우병독성복사병독(BVDV)%우호흡도합포체병독(BRSV)%우부류감병독3형(BPIV-3)
multiple RT-PCR%bovine viral diarrhea virus (BVDV)%bovine respiratory syncytial virus (BRSV)%bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV-3)
根椐GenBank中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)和牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV-3)3种病毒基因序列,设计合成引物,建立3种病毒的三重RT-PCR方法.用这3对引物对同一样品中的BVDV、BRSV和BPIV-3核酸模板进行三重RT-PCR扩增,结果显示:可同时扩增BVDV的466 bp,BRSV的735 bp和BPIV-3的258 bp的特异性片段,而对其他4种病原的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10 pg的BVDV、1 pg的BHV-3和10 pg的BRSV模板.用37份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示:两者的总符合率为100%.结果表明:建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断.
根椐GenBank中牛病毒性腹瀉病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛呼吸道閤胞體病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)和牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV-3)3種病毒基因序列,設計閤成引物,建立3種病毒的三重RT-PCR方法.用這3對引物對同一樣品中的BVDV、BRSV和BPIV-3覈痠模闆進行三重RT-PCR擴增,結果顯示:可同時擴增BVDV的466 bp,BRSV的735 bp和BPIV-3的258 bp的特異性片段,而對其他4種病原的PCR擴增結果均為陰性;敏感性測定結果錶明,該三重RT-PCR技術能檢齣10 pg的BVDV、1 pg的BHV-3和10 pg的BRSV模闆.用37份臨床病料對本研究多重RT-PCR技術和單項RT-PCR技術進行對比驗證,結果顯示:兩者的總符閤率為100%.結果錶明:建立的多重RT-PCR檢測方法,具有特異、快速、準確的特點,可用于對這3種病毒的同時檢測和鑒彆診斷.
근거GenBank중우병독성복사병독(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、우호흡도합포체병독(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)화우부류감병독3형(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV-3)3충병독기인서렬,설계합성인물,건립3충병독적삼중RT-PCR방법.용저3대인물대동일양품중적BVDV、BRSV화BPIV-3핵산모판진행삼중RT-PCR확증,결과현시:가동시확증BVDV적466 bp,BRSV적735 bp화BPIV-3적258 bp적특이성편단,이대기타4충병원적PCR확증결과균위음성;민감성측정결과표명,해삼중RT-PCR기술능검출10 pg적BVDV、1 pg적BHV-3화10 pg적BRSV모판.용37빈림상병료대본연구다중RT-PCR기술화단항RT-PCR기술진행대비험증,결과현시:량자적총부합솔위100%.결과표명:건립적다중RT-PCR검측방법,구유특이、쾌속、준학적특점,가용우대저3충병독적동시검측화감별진단.