现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2013年
6期
1209-1213
,共5页
马楠%祁馨卉%崔慧霞%李妍%刘云鹏%姜又红
馬楠%祁馨卉%崔慧霞%李妍%劉雲鵬%薑又紅
마남%기형훼%최혜하%리연%류운붕%강우홍
树突状细胞%TGF-β1%Smad3%肿瘤疫苗
樹突狀細胞%TGF-β1%Smad3%腫瘤疫苗
수돌상세포%TGF-β1%Smad3%종류역묘
dentritic cells%TGF-β1%Smad3%tumor vaccines
目的:研究在通过siRNA(small interference,RNA)干扰技术沉默外周单核细胞来源的树突细胞(dentritic cells,DC)的Smad3,阻断TGF-β1/Smad3传导通路,并在外源性TGF-β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)的作用下对树突状细胞疫苗的影响.方法:针对设计Smad3特异性siRNA利用RNAIMAX转入DC细胞并用Westen-blot法检测Smad3的沉默效果.应用重组人粒细胞-单核细胞集落刺激因子(hmGM-CSF)和重组人白介素-4(hmlL-4),刺激DC成熟.利用反复冻融的方法提取乳腺癌细胞MCF-7的全抗原.实验分组:Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组和TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组.流式检测各组DC成熟表型的变化,ELISA检测各组DC上清IL-12的水平,CCK-8法检测DC诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀瘤活性.结果:TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组表面成熟标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR(P ＜0.05)及IL-12分泌水平(P＜0.05)明显高于TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组和TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-冻融抗原(Ag)-DC组.且TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀瘤活性较TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组明显增强.结论:通过沉默DC的Smad3的方法,阻断TGF-β/Smad3传导通路,能逆转TGF-β1对DC分化发育和递呈乳腺癌相关抗原的作用.
目的:研究在通過siRNA(small interference,RNA)榦擾技術沉默外週單覈細胞來源的樹突細胞(dentritic cells,DC)的Smad3,阻斷TGF-β1/Smad3傳導通路,併在外源性TGF-β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)的作用下對樹突狀細胞疫苗的影響.方法:針對設計Smad3特異性siRNA利用RNAIMAX轉入DC細胞併用Westen-blot法檢測Smad3的沉默效果.應用重組人粒細胞-單覈細胞集落刺激因子(hmGM-CSF)和重組人白介素-4(hmlL-4),刺激DC成熟.利用反複凍融的方法提取乳腺癌細胞MCF-7的全抗原.實驗分組:Control-DC-凍融抗原(Ag)組、TGF-β1-Control-DC-凍融抗原(Ag)組、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-凍融抗原(Ag)組和TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-凍融抗原(Ag)組.流式檢測各組DC成熟錶型的變化,ELISA檢測各組DC上清IL-12的水平,CCK-8法檢測DC誘導細胞毒性T淋巴細胞(CTL)殺瘤活性.結果:TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-凍融抗原(Ag)組錶麵成熟標誌CD80、CD83、CD86、HLA-DR(P ＜0.05)及IL-12分泌水平(P＜0.05)明顯高于TGF-β1-Control-DC-凍融抗原(Ag)組和TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-凍融抗原(Ag)-DC組.且TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-凍融抗原(Ag)組誘導細胞毒性T淋巴細胞(CTL)殺瘤活性較TGF-β1-Control-DC-凍融抗原(Ag)組、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-凍融抗原(Ag)組明顯增彊.結論:通過沉默DC的Smad3的方法,阻斷TGF-β/Smad3傳導通路,能逆轉TGF-β1對DC分化髮育和遞呈乳腺癌相關抗原的作用.
목적:연구재통과siRNA(small interference,RNA)간우기술침묵외주단핵세포래원적수돌세포(dentritic cells,DC)적Smad3,조단TGF-β1/Smad3전도통로,병재외원성TGF-β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)적작용하대수돌상세포역묘적영향.방법:침대설계Smad3특이성siRNA이용RNAIMAX전입DC세포병용Westen-blot법검측Smad3적침묵효과.응용중조인립세포-단핵세포집락자격인자(hmGM-CSF)화중조인백개소-4(hmlL-4),자격DC성숙.이용반복동융적방법제취유선암세포MCF-7적전항원.실험분조:Control-DC-동융항원(Ag)조、TGF-β1-Control-DC-동융항원(Ag)조、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-동융항원(Ag)조화TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-동융항원(Ag)조.류식검측각조DC성숙표형적변화,ELISA검측각조DC상청IL-12적수평,CCK-8법검측DC유도세포독성T림파세포(CTL)살류활성.결과:TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-동융항원(Ag)조표면성숙표지CD80、CD83、CD86、HLA-DR(P ＜0.05)급IL-12분비수평(P＜0.05)명현고우TGF-β1-Control-DC-동융항원(Ag)조화TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-동융항원(Ag)-DC조.차TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-동융항원(Ag)조유도세포독성T림파세포(CTL)살류활성교TGF-β1-Control-DC-동융항원(Ag)조、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-동융항원(Ag)조명현증강.결론:통과침묵DC적Smad3적방법,조단TGF-β/Smad3전도통로,능역전TGF-β1대DC분화발육화체정유선암상관항원적작용.
