CAJ | 학술논문

目的:检测β-catenin在化学诱导C57 BL/6J小鼠肝癌过程中各时期的动态变化.方法:化学法[二乙基亚硝胺(diethylnirtosamine,DEN)/四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)/乙醇]诱发50只C57 BL/6J雄性小鼠肝癌,对照组为45只正常C57BL/6J雄性小鼠.观察小鼠成瘤情况和生长状态,对每2周定期处死小鼠获得的组织标本分别进行病理学切片观察,并采用荧光实时定量PCR、免疫组织化学法和蛋白质印迹法分别检测β-catenin mRNA和蛋白的表达情况.结果:化学诱导20周后,成功诱发小鼠肝癌.荧光实时定量PCR第4周起小鼠肝癌组织中β-catenin的表达高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).随着诱癌时间的增加,β-catenin的表达量呈上升趋势,第18和20周时诱癌组β-catenin的表达明显高于前一诱癌组(P＜0.05).蛋白印记法及免疫组化检测发现诱癌组第4周起至第14周细胞核内β-catenin有表达,细胞质内的表达也较正常对照组多,细胞膜表达减弱,这期间诱癌组间细胞核和细胞浆内β-catenin表达无明显差异.第16周可发现细胞浆内的β-catenin蛋白表达较之前时间组降低,第20周降至最低.而第18周和第20周细胞核的β-catenin蛋白表达明显多于前面时间段,第20周最多.细胞膜无表达.结论:随着肝癌演变,细胞浆内的β-catenin蛋白有可能向细胞核内移位,致使细胞核内β-catenin蛋白更进一步累积,激活一系列靶基因,导致肝癌形成.β-catenin蛋白在细胞膜、细胞浆和细胞核中分布在正常肝脏组织、肝硬化、肝癌这一过程中均小相同,表明β-catenin与肝癌的发生发展有密切关系.
목적:검측β-catenin재화학유도C57 BL/6J소서간암과정중각시기적동태변화.방법:화학법[이을기아초알(diethylnirtosamine,DEN)/사록화탄(carbon tetrachloride,CCl4)/을순]유발50지C57 BL/6J웅성소서간암,대조조위45지정상C57BL/6J웅성소서.관찰소서성류정황화생장상태,대매2주정기처사소서획득적조직표본분별진행병이학절편관찰,병채용형광실시정량PCR、면역조직화학법화단백질인적법분별검측β-catenin mRNA화단백적표체정황.결과:화학유도20주후,성공유발소서간암.형광실시정량PCR제4주기소서간암조직중β-catenin적표체고우정상대조조,차이유통계학의의(P＜0.05).수착유암시간적증가,β-catenin적표체량정상승추세,제18화20주시유암조β-catenin적표체명현고우전일유암조(P＜0.05).단백인기법급면역조화검측발현유암조제4주기지제14주세포핵내β-catenin유표체,세포질내적표체야교정상대조조다,세포막표체감약,저기간유암조간세포핵화세포장내β-catenin표체무명현차이.제16주가발현세포장내적β-catenin단백표체교지전시간조강저,제20주강지최저.이제18주화제20주세포핵적β-catenin단백표체명현다우전면시간단,제20주최다.세포막무표체.결론:수착간암연변,세포장내적β-catenin단백유가능향세포핵내이위,치사세포핵내β-catenin단백경진일보루적,격활일계렬파기인,도치간암형성.β-catenin단백재세포막、세포장화세포핵중분포재정상간장조직、간경화、간암저일과정중균소상동,표명β-catenin여간암적발생발전유밀절관계.