中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2013年
6期
570-575
,共6页
李辉%徐军美%袁贵秀%李晋%陈章玲
李輝%徐軍美%袁貴秀%李晉%陳章玲
리휘%서군미%원귀수%리진%진장령
多巴胺D1受体%RNA干扰%NG-108-15细胞
多巴胺D1受體%RNA榦擾%NG-108-15細胞
다파알D1수체%RNA간우%NG-108-15세포
dopamine D1 receptor%RNA interference%NG-108-15 cell
目的:构建多巴胺D1受体(DRD1)表达干扰载体,为研究DRD1在神经细胞中的作用及抗惊厥药物打下基础.方法:根据GenBank中DRD1基因序列,设计10个干扰序列并构建DRD1干扰载体.对NG-108-15进行脂质体转染后,GFP标记检测转染效果.Real-time PCR和Western印迹检测NG-108-15中DRD1的表达量.结果:构建的10个干扰载体均能采用脂质体法转染到NG-108-15细胞中.转染后NG-108-15中DRD1 mRNA和蛋白的表达均明显下降.其中转染pGPU6-GFP-Neo-si-DRD 1-5载体的NG-108-15中DRD1 mRNA表达水平最低,而转染pGPU6-GFP-Neo-si-DRD1-1,-2,-6,-7载体的NG-108-15中DRD1蛋白表达水平最低.结论:成功构建了DRD1表达干扰载体.
目的:構建多巴胺D1受體(DRD1)錶達榦擾載體,為研究DRD1在神經細胞中的作用及抗驚厥藥物打下基礎.方法:根據GenBank中DRD1基因序列,設計10箇榦擾序列併構建DRD1榦擾載體.對NG-108-15進行脂質體轉染後,GFP標記檢測轉染效果.Real-time PCR和Western印跡檢測NG-108-15中DRD1的錶達量.結果:構建的10箇榦擾載體均能採用脂質體法轉染到NG-108-15細胞中.轉染後NG-108-15中DRD1 mRNA和蛋白的錶達均明顯下降.其中轉染pGPU6-GFP-Neo-si-DRD 1-5載體的NG-108-15中DRD1 mRNA錶達水平最低,而轉染pGPU6-GFP-Neo-si-DRD1-1,-2,-6,-7載體的NG-108-15中DRD1蛋白錶達水平最低.結論:成功構建瞭DRD1錶達榦擾載體.
목적:구건다파알D1수체(DRD1)표체간우재체,위연구DRD1재신경세포중적작용급항량궐약물타하기출.방법:근거GenBank중DRD1기인서렬,설계10개간우서렬병구건DRD1간우재체.대NG-108-15진행지질체전염후,GFP표기검측전염효과.Real-time PCR화Western인적검측NG-108-15중DRD1적표체량.결과:구건적10개간우재체균능채용지질체법전염도NG-108-15세포중.전염후NG-108-15중DRD1 mRNA화단백적표체균명현하강.기중전염pGPU6-GFP-Neo-si-DRD 1-5재체적NG-108-15중DRD1 mRNA표체수평최저,이전염pGPU6-GFP-Neo-si-DRD1-1,-2,-6,-7재체적NG-108-15중DRD1단백표체수평최저.결론:성공구건료DRD1표체간우재체.
