动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2014年
6期
26-31
,共6页
猪圆环病毒2型%毒力%重组%基因型
豬圓環病毒2型%毒力%重組%基因型
저원배병독2형%독력%중조%기인형
Porcine circovirus type 2%virulence%recombination%gene type
为了解某猪场猪圆环病毒2型（PCV-2）的流行及毒株基因组变异情况，应用 PCR 方法从6个疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）病死猪的心脏、淋巴结、脾脏和肺脏等病料中进行猪圆环2型病毒的检测，并对阳性病料进行 PCV-2全基因组的扩增，将成功扩增到的6株 PCV-2全基因组克隆到 pMD-18T Simple Vector，构建重组质粒。对全基因组进行测序，然后对全基因组进行同源性、遗传进化、重组以及毒力分析。结果表明，6株 PCV-2基因组长度均为1767 bp，与参考序列的同源性在88．1％～99．6％之间，并且 LNF3、HEBF5和 HEN65为 PCV-2b1C 基因型，LN51为 PCV-2b1B 基因型，HEN60株为 PCV-2b1A 基因型，HEBF7属于 PCV-2a，但不属于任何亚型，可能为 PCV-2a 向 PCV-2b 的过渡株。利用重组分析软件RDP4．25和 SIMPLOT3．5．1分析，表明 LN51株可能来自 PCV-2a2A 和 PCV-2b1A 基因型的重组。根据PCV-2 Cap 的76位和131位氨基酸残基，有5株符合强毒特征（76I、131T），而 HEBF7株存在强、弱毒的特征。本研究为我国 PCV-2流行株的分子特征研究提供了参考。
為瞭解某豬場豬圓環病毒2型（PCV-2）的流行及毒株基因組變異情況，應用 PCR 方法從6箇疑似斷奶仔豬多繫統衰竭綜閤徵（PMWS）病死豬的心髒、淋巴結、脾髒和肺髒等病料中進行豬圓環2型病毒的檢測，併對暘性病料進行 PCV-2全基因組的擴增，將成功擴增到的6株 PCV-2全基因組剋隆到 pMD-18T Simple Vector，構建重組質粒。對全基因組進行測序，然後對全基因組進行同源性、遺傳進化、重組以及毒力分析。結果錶明，6株 PCV-2基因組長度均為1767 bp，與參攷序列的同源性在88．1％～99．6％之間，併且 LNF3、HEBF5和 HEN65為 PCV-2b1C 基因型，LN51為 PCV-2b1B 基因型，HEN60株為 PCV-2b1A 基因型，HEBF7屬于 PCV-2a，但不屬于任何亞型，可能為 PCV-2a 嚮 PCV-2b 的過渡株。利用重組分析軟件RDP4．25和 SIMPLOT3．5．1分析，錶明 LN51株可能來自 PCV-2a2A 和 PCV-2b1A 基因型的重組。根據PCV-2 Cap 的76位和131位氨基痠殘基，有5株符閤彊毒特徵（76I、131T），而 HEBF7株存在彊、弱毒的特徵。本研究為我國 PCV-2流行株的分子特徵研究提供瞭參攷。
위료해모저장저원배병독2형（PCV-2）적류행급독주기인조변이정황，응용 PCR 방법종6개의사단내자저다계통쇠갈종합정（PMWS）병사저적심장、림파결、비장화폐장등병료중진행저원배2형병독적검측，병대양성병료진행 PCV-2전기인조적확증，장성공확증도적6주 PCV-2전기인조극륭도 pMD-18T Simple Vector，구건중조질립。대전기인조진행측서，연후대전기인조진행동원성、유전진화、중조이급독력분석。결과표명，6주 PCV-2기인조장도균위1767 bp，여삼고서렬적동원성재88．1％～99．6％지간，병차 LNF3、HEBF5화 HEN65위 PCV-2b1C 기인형，LN51위 PCV-2b1B 기인형，HEN60주위 PCV-2b1A 기인형，HEBF7속우 PCV-2a，단불속우임하아형，가능위 PCV-2a 향 PCV-2b 적과도주。이용중조분석연건RDP4．25화 SIMPLOT3．5．1분석，표명 LN51주가능래자 PCV-2a2A 화 PCV-2b1A 기인형적중조。근거PCV-2 Cap 적76위화131위안기산잔기，유5주부합강독특정（76I、131T），이 HEBF7주존재강、약독적특정。본연구위아국 PCV-2류행주적분자특정연구제공료삼고。
Samples from hearts,lymph nodes,spleens and lungs of suspected postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS)pigs were collected.One pair of primers specific to porcine circovirus type 2 (PCV-2)were designed and synthesized,and PCV-2 total genome were amplified by use of PCR from the total DNA retracted from the tissue culture.Six positive amplication products were inserted into pMD-18T Simple Vector to establish recombinant plasmids.Sequencing result showed that 6 PCV-2 genomes were obtained from isolate strains and all the genomic lengths were 1 767 bp.Homology analysis showed that genotypes of LNF3,HEBF5 and HEN65 strains are PCV-2b1C,LN51 genotype is PCV-2b1B,HEN60 is PCV-2b1A genotype,HEBF7 belongs to the PCV-2a.By the use of the analysis software RDP4.25 and SIMPLOT 3.5.1,LN51 strain may come from a recombinant from PCV-2a2A and PCV-2b1A genotypes. According to the amino acid residues located at 76 and 131 of PCV-2 capsid protein Cap,virulent features (76I,131T)are existed in 5 strains,while HEBF7 contained both virulent and attenuated characteristics. This research provides another view for the molecular characteristics of PCV-2 isolates in China.
