CAJ | 학술논문

目的：为研究IL-18密码子优化合成与蛋白质高表达，更好的发挥IL-18在基础研究与临床中的应用，本研究采用野生型IL-18在大肠杆菌中表达高频率的密码子，自行设计8个PCR片段，用PCR；方法：得到IL-18的cDNA，利用EcoR I双酶切将其插入pGEX-4T-1载体中，转化大肠杆菌JM109。筛选出阳性菌落，提取质粒，转化大肠杆菌BL-21 DE3中进行表达，纯化。结果：显示：经纯化所获得的优化IL-18的氨基酸序列、生物学活性与野生型IL-18完全一致，蛋白质产量较野生型IL-18高约5倍。结论：本研究可以实现较高水平的蛋白质，也给纯化带来了方便，为大规模生产提供了较理想的表达株，同时为治疗性疫苗研究奠定了基础。
목적：위연구IL-18밀마자우화합성여단백질고표체，경호적발휘IL-18재기출연구여림상중적응용，본연구채용야생형IL-18재대장간균중표체고빈솔적밀마자，자행설계8개PCR편단，용PCR；방법：득도IL-18적cDNA，이용EcoR I쌍매절장기삽입pGEX-4T-1재체중，전화대장간균JM109。사선출양성균락，제취질립，전화대장간균BL-21 DE3중진행표체，순화。결과：현시：경순화소획득적우화IL-18적안기산서렬、생물학활성여야생형IL-18완전일치，단백질산량교야생형IL-18고약5배。결론：본연구가이실현교고수평적단백질，야급순화대래료방편，위대규모생산제공료교이상적표체주，동시위치료성역묘연구전정료기출。