河南医学研究
河南醫學研究
하남의학연구
HENAN MEDICAL RESEARCH
2014年
5期
11-14
,共4页
周期蛋白 E%HepG2%肝癌%增殖
週期蛋白 E%HepG2%肝癌%增殖
주기단백 E%HepG2%간암%증식
目的:探讨RNAi cyclin E对肝癌细胞生长的影响.方法:肝癌细胞系HepG2采用体外培养,选取siRNA合成双链发卡样DNA;将其重组入pGFP-V-RS得到重组子pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122:两重组子分别进行DNA序列测定、同源性比较;将两重组子和pGFP-V-Con分别转入人肝癌HepG2细胞中,同时设空白对照组(不转染任何质粒,仅加转染试剂).检测4组HepG2细胞cyclin E mRNA表达情况及细胞的增殖情况.结果:经过同源性检索和优选确定cyclin E基因的siRNA载体pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122;干扰1组(转染pGFP-V-RS-siCE951)和干扰2组(转染pGFP-V-RS-siCE1122)细胞cyclin E mRNA的相对表达量显著低于空白对照组和无关siRNA对照组(P＜0.05);干扰1组和干扰2组与空白对照组和无关siRNA对照组比较,在3、4、5d细胞孔内的吸光度值显著减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:siRNA载体pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122转染人肝癌HepG2细胞能显著降低细胞cyclin E基因的表达,是理想的siRNA靶区段.抑制肝癌HepG2细胞cyclin E基因表达,可以降低肝癌HepG2细胞的生长速度.
目的:探討RNAi cyclin E對肝癌細胞生長的影響.方法:肝癌細胞繫HepG2採用體外培養,選取siRNA閤成雙鏈髮卡樣DNA;將其重組入pGFP-V-RS得到重組子pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122:兩重組子分彆進行DNA序列測定、同源性比較;將兩重組子和pGFP-V-Con分彆轉入人肝癌HepG2細胞中,同時設空白對照組(不轉染任何質粒,僅加轉染試劑).檢測4組HepG2細胞cyclin E mRNA錶達情況及細胞的增殖情況.結果:經過同源性檢索和優選確定cyclin E基因的siRNA載體pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122;榦擾1組(轉染pGFP-V-RS-siCE951)和榦擾2組(轉染pGFP-V-RS-siCE1122)細胞cyclin E mRNA的相對錶達量顯著低于空白對照組和無關siRNA對照組(P＜0.05);榦擾1組和榦擾2組與空白對照組和無關siRNA對照組比較,在3、4、5d細胞孔內的吸光度值顯著減少,差異有統計學意義(P＜0.05).結論:siRNA載體pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122轉染人肝癌HepG2細胞能顯著降低細胞cyclin E基因的錶達,是理想的siRNA靶區段.抑製肝癌HepG2細胞cyclin E基因錶達,可以降低肝癌HepG2細胞的生長速度.
목적:탐토RNAi cyclin E대간암세포생장적영향.방법:간암세포계HepG2채용체외배양,선취siRNA합성쌍련발잡양DNA;장기중조입pGFP-V-RS득도중조자pGFP-V-RS-siCE951화pGFP-V-RS-siCE1122:량중조자분별진행DNA서렬측정、동원성비교;장량중조자화pGFP-V-Con분별전입인간암HepG2세포중,동시설공백대조조(불전염임하질립,부가전염시제).검측4조HepG2세포cyclin E mRNA표체정황급세포적증식정황.결과:경과동원성검색화우선학정cyclin E기인적siRNA재체pGFP-V-RS-siCE951화pGFP-V-RS-siCE1122;간우1조(전염pGFP-V-RS-siCE951)화간우2조(전염pGFP-V-RS-siCE1122)세포cyclin E mRNA적상대표체량현저저우공백대조조화무관siRNA대조조(P＜0.05);간우1조화간우2조여공백대조조화무관siRNA대조조비교,재3、4、5d세포공내적흡광도치현저감소,차이유통계학의의(P＜0.05).결론:siRNA재체pGFP-V-RS-siCE951화pGFP-V-RS-siCE1122전염인간암HepG2세포능현저강저세포cyclin E기인적표체,시이상적siRNA파구단.억제간암HepG2세포cyclin E기인표체,가이강저간암HepG2세포적생장속도.
